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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
50
- 检测方法:
微量法、可见分光光度法
- 规格:
100管/96样/50管/48样
| 规格: | 100管/96样 | 产品价格: | ¥910.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50管/48样 | 产品价格: | ¥468.0 |
| 产品名称 | α酮戊二酸脱氢酶(αKGDH)测试盒 |
| 规格 | 100管/96样 50管/48样 |
| 测试方法 | 微量法、紫外分光光度法 |
| 货号 | LZ-S01140 |
商品介绍:
测定意义
α-KGDH(EC 1.2.4.2)广泛存在于动物、植物微生物和培养细胞的线粒体中,是三羧酸循环调控关键酶之一,催化α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰辅酶A。
测定原理
α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和辅酶A生成琥珀酰辅酶A、 二氧化碳和 NADH,NADH在340 nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤(以组织样本为例):
1、样本处理:称取1g组织于玻璃管中,加入1mL 6mol/L HCl,放入110℃烘箱中6~12h,离心机16000g 25℃离心20min,取上清液至新离心管中 ,然后加10mol/L NaOH调节pH至7.0。
2、试剂准备:
1)Substrate:加入8mL Substrate Diluent溶解。(现配现用)
2)Dye Reagent:加入4mL Dye Reagent Diluent溶解。(现配现用)
3)标准品:加入1mL蒸馏水溶解Standard得到Standard①;从Standard①取10μL加入990μL蒸馏水中得到Standard②;取200μL Standard②加入800μL蒸馏水中,制备得到浓度为200μmol/L的Standard。
\商品介绍:
测定意义
MDH (EC 1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物, 连接多条重要的代谢途径。因此,MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH, NADP-MDH主要存在于真核细胞中。
测定原理:
NADP-MDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸,导致340nm处光吸收下降。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
注意事项:
1.阳性对照H2O2一般使用浓度为100 μM (推荐浓度50-200 μM,具体依细胞类型而定) 。通常刺激后30 min-4 h可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞,活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后30 min内观察不到活性氧的升高,可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果荧光信号过强,可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。
2.实验过程中,如果阴性对照细胞荧光也比较强,可以按照1:2000-1:5000 稀释荧光探针DCFH-DA,使DCFH-DA的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间可在15-60 min 内适当进行调整,尽量缩短读片时的曝光时间,并且试验组、对照组曝光时间需保持一致。
活性氧阳性对照 (H2O2) 仅仅用于作为阳性对照的样品,并非所有试验组样品中都需加入活性氧阳性对照。
3.探针装载后,一定要洗净未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。
优势:
1.提供了详细的样品制备和结果计算方法;
2.提供标准品和标准曲线作参考;
3.经过多种样本验证;动植物组织、细胞、血清、血浆,细菌等样本均已经过了验证,高度的兼容和匹配度,让您的样本充分发挥作用,不浪费。
4.无放射性,安全稳定;无放射性试剂,其保质期长达一年以上,排除客观因素的干扰。
5.操作便捷;步骤简单,2小时内完成检测。
| Serine/Threonine Kinase 3 (STK3) | 全血线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒 |
| Serine/Threonine Kinase 11 (STK11) | 动物血小板线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒 |
| Serine Palmitoyltransferase, Long Chain Base Subunit 3 (SPTLC3) | 线粒体呼吸链复合物I(NADH-辅酶Q还原酶)活性定量检测试剂盒 |
| Serine Palmitoyltransferase, Long Chain Base Subunit 3 (SPTLC3) | 线粒体呼吸链复合物II(琥珀酸-辅酶Q还原酶) |
| Serine Palmitoyltransferase, Long Chain Base Subunit 2 (SPTLC2) | 活性定量检测试剂盒 |
| Serine Palmitoyltransferase, Long Chain Base Subunit 1 (SPTLC1) | 线粒体呼吸链复合物III(辅酶Q-酶) |
| Serine Hydroxytransferase 2, Mitochondrial (SHMT2) | 线粒体呼吸链复合物IV(正铁-氧化还原酶) |
| Serine Carboxypeptidase 1 (SCPEP1) | 线粒体呼吸链复合物V(F0F1-ATP酶/ATP合成酶) |
| Sepiapterin Reductase (SPR) | 海洋动物(虾贝类)线粒体粗提分离试剂盒 |
| Sepiapterin Reductase (SPR) | 海洋动物(虾贝类)活性线粒体分离试剂盒 |
| SCO Cytochrome Oxidase Deficient Homolog 2 (SCO2) | 海洋动物(虾贝类)高质纯化线粒体分离试剂盒 |
| Salt Inducible Kinase 2 (SIK2) | 活体细胞线粒体膜通道孔(MPTP)荧光检测试剂盒 |
| Salt Inducible Kinase 2 (SIK2) | 纯化线粒体膜通道孔(MPTP)荧光检测试剂盒 |
| Salivary Alpha Amylase (AMY1A) | 纯化线粒体膜通道孔(MPTP)比色法检测试剂盒 |
| Salivary Alpha Amylase (AMY1A) | 冰冻切片组织线粒体膜通道孔(MPTP)荧光检测试剂盒 |
| RNA Exonuclease 2 Homolog (REXO2) | 纯化线粒体冻存液(酶学和膜结构保护) |
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文献和实验α-酮戊二酸脱氢酶 α-ketoglutarate dehy-drogenase
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