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10
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VP2
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2年
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费雪医学研究有限公司
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-20℃以下
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0.5mg

500μg 鸡法氏囊病毒重组VP2蛋白;法氏囊病毒VP2蛋白;禽法氏囊蛋白;鸡法氏囊抗原;法氏囊抗原
禽传染性法氏囊病病毒(IBDV)是引起禽传染性法氏囊病的病原体,对养鸡业危害较大。
病毒特性
病毒分类:属于双 RNA 病毒科禽双 RNA 病毒属。
形态结构:病毒粒子呈二十面体对称,无囊膜,直径约为 55 - 60 纳米。由 VP2、VP3、VP4 和 VP5 四种结构蛋白组成,其中 VP2 是主要的免疫原性蛋白,能诱导机体产生中和抗体,与病毒的毒力和免疫保护密切相关。
理化特性:该病毒具有较强的抵抗力,在外界环境中能长时间存活。对氯仿等有机溶剂不敏感,耐酸、耐热,在 pH 2 的环境中仍能存活,60℃ 90 分钟仍可保持活性,但在 70℃以上条件下可被灭活,对紫外线和各种消毒剂敏感。
流行病学
易感动物:主要感染鸡,尤其是 3 - 6 周龄的雏鸡最易感,火鸡、鸭、鹅等也可感染,但症状通常较轻。
传播途径:主要通过消化道和呼吸道传播。病鸡的粪便中含有大量病毒,污染饲料、饮水、垫料等,健康鸡接触后可被感染。此外,病毒还可通过空气传播,在鸡舍内近距离传播迅速。
流行特点:该病具有高度传染性,一旦发生,传播速度快,发病率高,可达 100%,但死亡率通常在 20% - 30% 左右,严重时可达 50% - 60%。
发病机制
病毒侵入鸡体后,首先在法氏囊的淋巴细胞中大量增殖,导致法氏囊受损,引起淋巴细胞的变性、坏死,使法氏囊的免疫功能下降。由于法氏囊是禽类重要的免疫器官,法氏囊的损伤会导致鸡的免疫抑制,使鸡对其他病原体的易感性增加,容易继发感染其他细菌和病毒,从而加重病情,增加死亡率。
临床症状
感染鸡表现为精神沉郁、食欲不振、羽毛蓬松、畏寒、扎堆。随后出现腹泻,排出白色或淡黄色水样粪便。病鸡严重脱水,体重减轻,最后因衰竭而死亡。有些病鸡还会出现啄肛现象。
病理变化
主要病变在法氏囊,法氏囊初期肿大,浆膜面有淡黄色胶冻样渗出物,黏膜表面有出血点或出血斑,严重时法氏囊内有干酪样坏死物。后期法氏囊萎缩,体积变小,颜色变深。此外,还可见到胸肌、腿肌有条纹状或斑点状出血,肾脏肿大、苍白,肾小管和输尿管内有尿酸盐沉积。
诊断方法
临床诊断:根据鸡群的发病日龄、临床症状和病理变化等进行初步诊断。如 3 - 6 周龄雏鸡出现突然发病、腹泻、法氏囊肿大或萎缩等特征性表现,可怀疑为禽传染性法氏囊病。
实验室诊断:包括病毒分离与鉴定、血清学检测和分子生物学检测等方法。病毒分离是将病料接种于鸡胚或细胞培养,观察鸡胚病变或细胞病变,并通过血清学方法进行鉴定。血清学检测常用的方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、琼脂扩散试验、中和试验等,可检测血清中的抗体或病料中的抗原。分子生物学检测方法如聚合酶链反应(PCR),可快速、准确地检测病毒的核酸,具有较高的特异性和灵敏度。

抗原结构与组成
VP2 蛋白:是法氏囊病毒的主要抗原蛋白,分子量约为 41 - 44kDa。其氨基酸序列的变异与病毒的毒力、抗原性密切相关,含有多个抗原表位,能诱导机体产生中和抗体,是疫苗研发和免疫检测的关键靶点。
VP3 蛋白:分子量约为 32 - 34kDa,具有群特异性抗原决定簇,在病毒粒子中含量较多,较为保守,可用于病毒的分类和诊断,但诱导中和抗体的能力较弱。
VP4 蛋白:是一种非结构蛋白,具有蛋白酶活性,参与病毒的复制和加工过程,分子量约为 28kDa,虽然不是主要的免疫原性蛋白,但在病毒感染和致病机制中起着重要作用。
抗原性
免疫原性:法氏囊病毒抗原具有良好的免疫原性,能刺激机体产生特异性的体液免疫和细胞免疫应答。其中,VP2 蛋白诱导产生的中和抗体在抗病毒感染中发挥关键作用,可阻止病毒吸附和侵入宿主细胞。
特异性:法氏囊病毒抗原具有高度的特异性,只能与相应的抗体发生特异性结合反应。通过血清学试验,如中和试验、ELISA、免疫荧光试验等,可以准确地检测出病毒抗原或相应的抗体,用于疾病的诊断和流行病学调查。不同血清型的法氏囊病毒之间,抗原性存在一定差异,目前主要有 I 型和 II 型,I 型对鸡具有致病性,II 型一般无致病性。
稳定性
物理稳定性:在一定的温度和 pH 范围内相对稳定。一般来说,在 4℃ - 8℃条件下可保存数周,-20℃或更低温度下可长期保存。但在反复冻融或高温、极端 pH 条件下,抗原的活性可能会降低。
化学稳定性:对一些常用的化学试剂有一定的耐受性,但在强氧化剂、强酸强碱等作用下,抗原结构可能会被破坏。例如,在福尔马林等固定剂的作用下,抗原表位可能会发生改变,因此在抗原制备和保存过程中,需要选择合适的化学试剂和处理条件。
纯度与浓度
纯度:在疫苗生产和诊断试剂研发中,高纯度的法氏囊病毒抗原至关重要。一般通过多种纯化方法,如超速离心、凝胶过滤、离子交换层析等,使抗原纯度达到 90% 以上,以减少杂质对免疫效果和检测结果的干扰。
浓度:抗原浓度直接影响免疫效果和检测灵敏度。在疫苗中,合适的抗原浓度能够诱导机体产生有效的免疫应答;在诊断试剂中,需要根据不同的检测方法和仪器,确定最佳的抗原包被浓度或工作浓度,以获得准确可靠的检测结果。通常采用蛋白定量方法,如 Bradford 法、Lowry 法等,来测定抗原的浓度。

性状:液体,避免反复冻融
ELISA效价: 0.005M PBS 体系下1:5000以上
蛋白浓度:3.5 mg/ml
缓冲液:0.01M PBS PH7.4
储存条件:-20℃以下
有效期:1年,在经常使用的情况下
有效期:2年,避免反复冻融
有效期:5年,-70℃以下保存
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文献和实验传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的高效表达与免疫原性分析
鸡传染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Disease virus,IBDV)引起的一种急性、高度传染性的免疫抑制性疾病。IBDV主要侵染雏鸡的中枢免疫器官法氏囊,在其B淋巴细胞上快速增殖,严重损坏B淋巴细胞的功能,从而导致机体免疫功能下降,引起免疫抑制,增加了其他传染性疾病对雏鸡的感染,从而使其免疫失败。IBDV主要结构蛋白VP2含有血清型特异性、能诱导中和抗体产生的构象依赖型抗原决定簇,其诱导的中和抗体能被动地保护宿主不受IBDV的感染,是IBDV的主要保护性抗原,具有特异性,因而成为制备法氏囊病基因工程亚单位疫苗的主要蛋白。
免疫血清 1.动物的选择 可作为免疫用的动物多为哺乳类和禽类,主要有家兔、绵羊、马、猪、驴、豚鼠和鸡等,其中实验常用家兔、绵羊、鸡和豚鼠。选择动物时要注意以下几个方面: a.抗原与动物种系 动物性抗原的免疫原性,随动物种系远近而有差别。近缘动物的蛋白质免疫原性弱,反之则强。因此选择动物时应选用亲缘关系较远的动物。 b
鸡传染性法氏囊病病毒抗体(IBDV-Ab)酶联免疫分析(ELISA)
鸡传染性法氏囊病病毒抗体(IBDV-Ab) 酶联免疫分析(ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定鸡血清,血浆及相关液体样本中 传染性法氏囊病病毒抗体(IBDV-Ab) 水平 。 实验原理: 本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法( ELISA )测定标本中鸡传染性法氏囊病病毒抗体 (IBDV-Ab) 。用纯化的鸡传染性法氏囊病病毒抗体 (IBDV-Ab) 抗原 包被微孔板,制成
强金标免疫技术(sliver-enhanced colloidal gold assay,SECGA),SECGA检测抗原可用IBV早期检测,具有群特异性、快速、敏感、简便、结果易判定。朱瑞良等[14]用免疫胶体金试纸膜进行快速检测传染性法氏囊病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)的研究,试验结果能够识别不同的IBDV毒株,包括强毒和弱毒,为IBDV的检测开辟了一条新的、快速的途径。(2)免疫胶体金技术在家畜疫病诊断中的应用郑鸣等[15]用胶体金标记抗原
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