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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
48
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 物种来源:
大鼠
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
基本信息:
细胞名称:大鼠阴道壁成纤维细胞
商品货号:YS-01X7746
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
原代细胞试用的实验类型:

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:
一、细胞增殖检测:
常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验

原代细胞培养方法及注意事项:


1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。

公司正在出售的产品:

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文献和实验开始时,我的细胞用胶原酶消化5h接种玻璃培养瓶,1.5h后吸出细胞液至另一培养瓶培养以去除成纤维细胞,原瓶内成纤维细胞加培养液继续培养,24h观察,发现转瓶后心肌细胞未贴壁,培养液中为大量细胞碎片状东西以及未贴壁的细胞悬浮,仅见极少量的成纤维细胞贴壁生长,接种24孔板也是这样(24孔板为新,非重复使用),接连几次都是这样,很是郁闷。而原瓶内分离的成纤维细胞生长良好,且可见少量心肌细胞贴壁成团生长,有搏动,一直疑惑不解什么原因导致转瓶后细胞贴壁失败。经过将近一个月的摸索,终于发现问题所在了! 写
1 )成纤维细胞培养 用人或动物胚体为好;动物可用小鼠或鸡胚,去头和内脏,剪成小碎块后,用胰蛋白酶消化法培养;如为人胚,可取皮肤培养。幼儿包皮是培养成纤维细胞的很好对象。 2) 巨噬细胞培养 1.实验前三天,向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸肉汤1ml(勿注入肠内)。 2.引颈杀死动物,手提鼠尾将全鼠浸入70%酒精中3~5秒。 3.置动物于解剖台上,用针头固定四肢,双手持镊撕开皮肤拉向两侧,暴露出腹膜,但勿伤及腹膜壁
结缔组织类细胞培养 1 )成纤维细胞培养 用人或动物胚体为好;动物可用小鼠或鸡胚,去头和内脏,剪成小碎块后,用胰蛋白酶消化法培养;如为人胚,可取皮肤培养。幼儿包皮是培养成纤维细胞的很好对象。 2) 巨噬细胞培养 1. 实验前三天,向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸肉汤 1ml (勿注入肠内)。 2. 引颈杀死动物,手提鼠尾将全鼠浸入 70 %酒精中
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