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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
27
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 物种来源:
大鼠
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
基本信息:
细胞名称:大鼠脊髓神经少突胶质细胞
商品货号:YS-01X7691
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
原代细胞试用的实验类型:

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:
一、细胞增殖检测:
常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验

原代细胞培养方法及注意事项:


1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。

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文献和实验机械性损伤导致细胞死亡等缺点。本实验采用视神经组织块培养的方法,对新生大鼠的视神经胶质细胞进行条件化原代培养,利用少突胶质细胞和星形胶质细胞生长条件的不同,采用条件培养基纯化2种细胞。少突胶质细胞和Ⅱ型星形胶质细胞是从一种普通双潜能的少突胶质细胞-2型星形胶质细胞祖细胞(oligodendrocyte-type-2astrocyte progenitor cell,O2A)发育而来。大鼠出生后约1周,少突胶质细胞逐渐成熟。因此,从新生大鼠取材可获得O2A祖细胞。体外研究发现甲状腺素、胰岛素、转铁
少突胶质细胞来源于1-2 天的大鼠。断头后大鼠大脑收集到Ham’s F-12培养液中,移除脑膜和血管。皮质用机械匀浆进行匀浆然后将细胞悬液依次通过230μm和104μm尼龙网进行过滤。细胞通过1000rpm 7分钟离心进行收集,用添加12.5%胎牛血清的DMEM进行重悬细胞。最后以2.0×105 cells/cm2浓度将细胞接种于培养皿中,将培养皿维持在37°C,5%CO2潮湿环境中。3天后更换培养基,以后每两天更换一次。9-11天后细胞能够铺满培养皿。少突胶质细胞祖代生长在星形
一、新生大鼠大脑皮层神经元分散培养 大脑皮质是大脑半球最外表的一层灰质,大脑皮质内神经元的数量极大,其类型也很多,但均属多极神经元,神经元之间具有复杂的联系,反映皮质的高度发展。有人从机能上将皮质分为:感觉皮质、联络皮质、运动皮质。 1. 材料和方法 取当天出生的Wistar大鼠,在无菌条件下取脑、分离出双侧皮层,培养方法同海马神经元培养。 2. 新生大鼠大脑皮层神经元的生长分化和形态特征 新生大鼠皮层元的生长分化和形态特征基本上和新生大鼠海马神经元相似。培养的皮层神经
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