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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
59
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 物种来源:
鸡
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
基本信息:
细胞名称:鸡外周血单核细胞
商品货号:YS-01X7054
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
原代细胞试用的实验类型:

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:
一、细胞增殖检测:
常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验

原代细胞培养方法及注意事项:


1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。

公司正在出售的产品:

| 杂交瘤细胞株;CH3 | 脊髓性肌萎缩症蛋白Gemin5封闭多肽 |
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| 杂交瘤细胞株;4G1 | 锌指蛋白312封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株;1C8 | β淀粉样肽(1-40) 多肽 |
| 杂交瘤细胞株;4F2 | T淋巴细胞CD1封闭多肽 |
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| 稳定表达GFP的shRNA靶向干扰YB-1基因人肺腺癌A549细胞株;A549/YBX1-homo-326 | 1号染色体开放阅读框172封闭多肽 |
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| 稳定表达GFP的shRNA靶向干扰YB-1基因人肺腺癌A549细胞株;A549/YBX1-homo-746 | 1号染色体开放阅读框222封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株;12G6 | HA Tag多肽 |
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文献和实验流式课堂 | 裂红 or 分离液?外周血不同制备方法应用场景
,会丢失一部分稀有细胞 ⊙ 可能会引起细胞受体激活 分离前 总 结 • 如研究对象是淋巴细胞、单核细胞或粒细胞,且细胞不需要进行培养或冻存,仅进行流式分析时,建议使用裂红法制备外周血样本; • 如研究对象是淋巴细胞亚群或单核细胞,在做以下实验时,建议使用 Ficoll 法提取 PBMC: (1)获得的细胞需要继续培养、刺激、阻断或冻存; (2)研究单核细胞。因为单核细胞只占白细胞的 3-10%,如果使用裂红法,会发现细胞群体太少。为了保证充足的样本量,需要使用 Ficoll 法。
裂解效果不佳,淋巴细胞群容易与红细胞及细胞碎片分群不清晰,且易有单核细胞混杂,不利于圈门位置的确定。而通过 CD45/SSC 圈门,可以使圈出的淋巴细胞更纯。 中华人民共和国卫生行业标准文件中的《流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南》也指出:建议联合 CD45 和 SSC 设门,确定淋巴细胞群。淋巴细胞群通常呈现 CD45 强阳性和 SSC 弱表达;相对于淋巴细胞,单核细胞的 CD45 呈弱表达,SSC 呈中等强度表达;嗜碱性粒细胞的 CD45 和 SSC 均为弱表达。同时,CD45 在三色、四
谁说压力就是动力?压力过大不利于抵抗新冠 / 流感,Nature 揭开其背后的免疫机制
了探索。 他们发现急性应激会将淋巴细胞和单核细胞从外周器官转移出来,并将它们临时隔离在骨髓中。同样地,在次级淋巴器官,如淋巴结和脾脏中的 T 细胞和 B 细胞,同样看到了淋巴细胞的急剧减少,这与重新分配到骨髓相一致。因此,这些数据表明急性应激可迅速引起各种类型免疫细胞的大规模全身再分配。 图片来源:Nature HPA 轴在急性应激中的作用 接下来,该团队进一步探讨了大脑与外周血白细胞动力学变化的关联。 首先,他们测试了下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)和交感神经系统(SNS
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