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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
38
- 生长状态:
贴壁
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
上皮样,多角形细胞
- 物种来源:
猪
- 组织来源:
肺组织
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
基本信息:
细胞名称:猪肺微血管内皮细胞
组织来源:肺组织
商品货号:YS-01X8176
种属来源:猪
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
包被条件:
培养基:原代內皮细胞培养体系
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮样,多角形细胞
传代特性:根据细胞特性
传代比例:
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:

肺微血管内皮细胞构成半选择性屏障,该屏障对于肺气体交换,调节液体和可溶物在血液与肺间质之间的流动具有重要意义。它还具有代谢功能,可以执行一定的非呼吸功能。在肺损伤中,肺微血管内皮细胞是活性氧类的重要靶细胞之一。在肺炎的发生过程中,神经体液介质和氧化剂作用于内皮细胞,使得细胞间隙渗透性增加,蛋白质由血液进入间质。细胞间隙渗透性的增加导致低氧血症,出现成人呼吸窘迫综合征和非心源性肺水肿。
原代细胞试用的实验类型:

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:
一、细胞增殖检测:
常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验

原代细胞培养方法及注意事项:


1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。

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文献和实验实验材料: 1. 手术切除的正常肺组织 2. 胰蛋白酶/EDTA液:0.05%胰蛋白酶,0.5mmol/L EDTA 3. 6孔培养板:用多聚赖氨酸包被 4. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS(pH=7.4),添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.4 5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊 6. 离心管(15ml、50ml) 实验方法: 1. 将肺组织至于无菌的培养皿中用含双抗的1×PBS
实验材料: 1. 牛或猪 2. PBS,含青霉素100U/ml和链霉素100μg/ml 3. 0.1%Ⅰ型胶原酶 4. 眼科剪,眼科镊 5. 慕丝线 6. 离心管(15ml、50ml) 实验方法: 1. 分离牛或猪的主动脉等大血管,长15-20cm,用丝线结扎血管各分支后,取出主动脉。放入盛有含青霉素100U/ml和链霉素100μg/ml的PBS平皿中,纵向切开血管壁,内皮
实验材料: 1. 牛或猪 2. PBS,含青霉素100U/ml和链霉素100μg/ml 3. 0.1%Ⅰ型胶原酶 4. 眼科剪,眼科镊 5. 慕丝线 6. 离心管(15ml、50ml) 实验方法: 1. 分离牛或猪的主动脉等大血管,长15-20cm,用丝线结扎血管各分支后,取出主动脉。放入含青霉素100U/ml和链霉素100μg/ml的PBS中,清洗血管,洗净血迹。 2. 用眼科剪和眼科镊剔除血管外膜的脂肪和结缔组织,用加入抗菌素的PBS冲洗
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