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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
42
- 生长状态:
贴壁
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
铺路石状,不规则细胞
- 物种来源:
兔
- 组织来源:
正常小肠组织
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
基本信息:
细胞名称:兔小肠黏膜上皮细胞
组织来源:正常小肠组织
商品货号:YS-01X8110
种属来源:兔
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
包被条件:
培养基:原代上皮细胞培养体系
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:铺路石状,不规则细胞
传代特性:根据细胞特性
传代比例:
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:

小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连。小肠与心互为表里。是食物消化吸收的主要场所,盘曲于腹腔内,上连胃幽门,下接盲肠,全长约5-6米,张开有半个篮球大,分为十二指肠、空肠和回肠三部分。其管壁由黏膜,黏膜下层,肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞,黏膜有许多绒毛,绒毛根部的上皮下陷至固有层,形成管状的肠腺,其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切。
原代细胞试用的实验类型:

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:
一、细胞增殖检测:
常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验

原代细胞培养方法及注意事项:


1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。

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文献和实验实验材料:1. 动物胎体胃黏膜,胃溃疡或胃癌手术切除的正常胃黏膜组织2. 1%Ⅳ胶原蛋白或1%明胶铺培养瓶,4℃冰箱内过夜,使用前在37℃培养箱内放置2h,然后用培养液浸洗1次。3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.44. 250000U/LⅠ型胶原酶或125000U/LⅠ型胶原酶和0.5%透明质酸酶,DMEM配置5. 解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊6. 离心管(15ml、50
胎鼠,放入70%乙醇中消毒1min。经腹正中切口取出小肠,放入预冷的PBS中。 2. 用PBS冲洗后,剪除肠系膜。纵行剪开肠壁,用PBS冲洗3次,洗去粘液。 3. 将肠壁剪成1mm3 左右的小块的组织块,放入20ml消化液中,37℃水浴中振荡消化30min。 4. 用吸管反复吹打组织块3-5min,然后以1000r/min,离心5min。吸去消化液后,加入PBS,反复吹打,悬浮沉淀的肠绒毛组织。在相差显微镜下观察可见单个黏膜上皮细胞或隐窝细胞团。 5. 将消化下来的细胞
实验材料: 1. 2—3月龄的家兔胆囊; 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 培养用液:以DMEM/F12为基础培养基,添加10%的胎牛血清、2 mmol/L谷氨酰胺、2μg/ml胰岛素、10 ng/ml表皮生长因子以及100 IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素。酶消化液为0.125%Ⅳ型胶原酶溶液。组织清洗液为DMEM培养液,并添加200 IU
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