人小肠成纤维细胞

基本信息：
细胞名称：人小肠成纤维细胞
组织来源：小肠组织
商品货号：YS-01X8004
种属来源：人
产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶
包被条件：
培养基：原代成纤维细胞培养体系
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁培养
细胞形态：成纤维样细胞
传代特性：细胞特性确定传代
传代比例：
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：  空气，95%；CO2 ，5%

细胞简介：

小肠位于腹中，  上端接幽门与胃相通，下端通过阑门与大肠相连，  是食物消化吸  收的主要场所。一般根据形态和结构变化将小肠分为三段，分别为十二指肠，空  肠和回肠。小肠壁结构一般分4层，由外向内依次为：浆膜层，  平滑肌层，粘膜下 层和粘膜层。粘膜层又分为3层：  靠近粘膜下层的是一层平滑肌，称为粘膜肌层。 其次为结缔组织，又称为固有层。后面向肠腔的是一层柱状上皮细胞构成的粘  膜。  成纤维细胞是结缔组织中常见的细胞，  电镜下，成纤维细胞胞质内可见丰  富的粗面内质网、游离核糖体和高尔基复合体，表明其具有合成和分泌蛋白质的  功能。己知成纤维细胞的主要功能之一是合成胶原蛋白及其他细胞外基质，  在组  织器官纤维化过程中发挥重要作用。

原代细胞试用的实验类型：

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA，RNA和遗传学研究等，还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验，如下：
一、细胞增殖检测：
常见检测方法：CCK8检测法 ，MTT检测法，Brdu检测法，Edu检测法，平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法：流式检测细胞周期，标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法：流式检测细胞凋亡，线粒体膜电位，活性氧检测，Hoechst染色，电镜，TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法：细胞划痕实验，Transwell实验，Invasion实验

原代细胞培养方法及注意事项：



1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。
3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切：用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500~1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。
7.计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2~7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。
8.培养：置于36.5℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶盖需拧松半圈。

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