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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
49
- 生长状态:
贴壁
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 物种来源:
兔
- 组织来源:
正常胃组织
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
基本信息:
细胞名称:兔胃粘膜上皮细胞
组织来源:正常胃组织
商品货号:YS-01X7967
种属来源:兔
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
包被条件:
培养基:原代上皮细胞培养体系
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:根据细胞特性
传代比例:
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:

胃黏膜柔软,活体呈橘红色。胃空虚时形成许多皱襞,充盈时变平坦。幽门处的黏膜形成环形皱襞,突向腔内称幽门瓣。胃黏膜可分为三层,即上皮层、固有层和黏膜肌层。其中,上皮层为单层柱状上皮,排列整齐,能分泌黏液覆盖于胃黏膜的表面,防止胃酸和胃蛋白酶对胃黏膜的损害。
原代细胞试用的实验类型:

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:
一、细胞增殖检测:
常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验

原代细胞培养方法及注意事项:


1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。

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文献和实验实验材料: 1. 2—3月龄的家兔胆囊; 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 培养用液:以DMEM/F12为基础培养基,添加10%的胎牛血清、2 mmol/L谷氨酰胺、2μg/ml胰岛素、10 ng/ml表皮生长因子以及100 IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素。酶消化液为0.125%Ⅳ型胶原酶溶液。组织清洗液为DMEM培养液,并添加200 IU
实验材料: 1. 大兔的正常食管组织 2. 6孔培养板:用多聚赖氨酸4℃包被过夜 3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.4 4. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊 实验方法: 1. 处死大兔,取正常食管组织放入含双抗的PBS(pH=7.2)中反复清洗3次,以洗去组织表面
片而不使囊膜片漂浮,每周换液2次。晶体上皮细胞在接种3天后,在倒置显微镜下可见,植块边缘有新生的细胞爬出,细胞呈规则六边形,大小均匀,胞质透明。一周后可融合成小片细胞。二周后可长满融合成单层细胞。细胞多为类圆形、多角形。2、传代培养:细胞铺满瓶底或生长到一定密度时,用0.25%胰蛋白酶消化,1∶2传代培养。传代时在培养瓶或培养皿底放置适当大小的盖玻片,细胞生长其上,便于光镜及免疫组化观察。细胞一般24h内贴壁,约3~4d细胞可达融合,融合的细胞和原代相似,大小基本一致。传代超过4~6代时,细胞的增长
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