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文献和实验实际上将作为阴性对照使用。CST 推荐使用 Histone H3 (D2B12) XP® Rabbit mAb (ChIP Formulated) #4620。该抗体可检测与基因组中所有 DNA 序列结合的所有组蛋白 H3 类型(H3、H3.3、CENP-A)。因此,不管检测的位点活性状态如何,该抗体都能为 ChIP 实验提供通用的阳性对照。 阴性对照 阴性对照抗体(如正常兔 IgG)不能识别特异抗原表位,因此可用于检测非特异性结合。例如,如果阴性对照样品中的产物量等于特异
(tetramethylbenzidine) Substrate Reagent Set: BioLegend Cat. No. 421101 TMB Stop Solution: 1M H3 PO4 or 2N H2 SO4 实验步骤 1. Coat the Plate: 1) Dilute unlabeled capture antibody to a final concentration
Active Motif ChIP 实验专家技术经验分享:如何判断 ChIP 成功与否?
对照转录因子)或 H3K4me3 的 ChIP(用于对照组蛋白修饰)。即使确定抗体可以用于做 ChIP,但对于目的细胞样本,如果之前没有做过,而且不确定目的蛋白结合的区域,一般也可以用别人报道过的对照细胞株作为对照,与目的细胞样本同时做 ChIP,确定 ChIP 是否成功。第二,整个实验是否真的 work?也就是如何排除假阳性?这就需要做阴性对照。阴性对照包括阴性对照抗体 IgG 和阴性对照区域(即阴性对照引物)。阴性对照 IgG 用于排除目的蛋白结合的 DNA 区域是抗体非特异性结合的,区域对照
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