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文献和实验TRAIL信号途径,如DR3、DR4、DR5,也可以充当“诱骗”受体,即所谓的DcRs,如DcR1、DcR2。Caspase酶 尽管有许多信号可以诱导细胞程序死亡,但它们有一些共同的特征,其中之一是凋亡时一系列细胞内蛋白水解酶——Caspase酶的活化。Caspase酶具有催化活性,“C”代表具有半胱氨酸水解酶功能,“aspase”代表具有切断天冬氨酸末端的功能。在对哺乳动物同源基因ced-3(线虫C. Elegans的细胞死亡基因)的研究中,首次发现了具有半胱氨酸水解酶活性的Caspase酶家族
)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且应该在破碎的同时多加几次;另外,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取。 这是标准配方: 裂解液:50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在这个pH范围内比较好发挥作用) 但我个人的经验
的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且应该在破碎的同时多加几次;另外,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取。 这是标准配方: 裂解液:50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在这个pH范围内比较好发挥作用) 但我个人的经验是:如果你裂解细菌是为了提取蛋白的话,而且蛋白的分子量又小于
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