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文献和实验相关专题磷酸化评估蛋白激酶将磷酸基团从ATP转移到蛋白多肽底物上的丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基,直接影响目标的活性和功能。放射性研究表明,真核细胞中大约30%的蛋白经过磷酸化修饰。这一关键的翻译后修饰调控了广泛的细胞活性,包括细胞周期 、分化、代谢和神经元通讯。此外,异常的磷酸化事件与许多疾病状态相关。在评估磷酸化时,选择的方法可能会有所不同,这取决于多个因素,包括提出的具体问题以及特殊仪器或试剂的可用性。如何检测蛋白磷酸化,本文简要介绍了几种常用方法,并提出了每种方法的优点和缺点
HDAC(Histone Deacetylase)组蛋白去乙酰化酶活性测定及药物筛选方案
显象剂作用后产生荧光团或发光团。最终的发光团可以用ELISA读板仪或酶标仪读取分析,荧光团则可以通过荧光读板仪或荧光计分析。试剂盒里也提供了Hela细胞核提取物(HeLa Nuclear Extract)作为阳性对照,以Trichostatin A作为阴性对照。此分析很适合用于高流通量筛选。 而HDACi(组蛋白去乙酰化酶抑制剂)药物筛选试剂盒 -HDAC Inhibitor Drug Screening Kit(K340-100)采用了与HDAC Fluorometric Assay Kit
Detection (端粒酶检测) 这是相对来说推出较早,用得较多的一种方法。端粒酶是由RNA和蛋白组成的核蛋白,它可以自身RNA为模板逆转录合成端粒区重复序列,使细胞获得“永生化”。正常体细胞是没有端粒酶活性的,每分裂一次,染色体的端粒会缩短,这可能作为有丝分裂的一种时钟,表明细胞年龄、复制衰老或细胞凋亡的信号。研究发现,90%以上的癌细胞或凋亡细胞都具有端粒酶的活性。Intergen公司的TRAP-eze Telemerase Detection Kit在1996年率先推出。它提供特定
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