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文献和实验原理。PKC底物被包被在酶标板上,在ATP存在的前提下,PKC激酶将底物磷酸化,洗掉游离的PKC激酶和其他成分。再加入特异性磷酸化抗体(只识别磷酸化底物,而与非磷酸化底物无交叉反应。)检测残留在酶标板上的磷酸化底物。通过酶标二抗放大信号,读出OD值(蛋白激酶活性与OD值的对数成正比)。与对照组相比,得出处理组的蛋白激酶活性 (PKA, PKB, PKC, SGK, S6K和Tyrosine Kinase)等非放射性蛋白激酶分析测试盒http://www.immunechem.com 本文
/go/WesternBlotProtocol。 酶联免疫吸附分析(ELISA) ELISA已逐渐成为测定蛋白磷酸化的一种有力方法。ELISA的定量能力优于Western blot,且在调节激酶活性和功能的研究中表现出巨大的作用。这种微孔板形式的分析一般利用目的蛋白特异的捕获抗体,与磷酸化状态无关。随后让目的蛋白结合在抗体包被的分析板中,目的蛋白可以是纯的,也可以是复杂的异质样品(如细胞裂解液)中的一个组分。加入待分析的磷酸化位点特异的检测抗体。这些分析通常设计为显色或荧光检测。产生的信号强度与最初样品中存在的磷酸化
所有PKC亚型了,那为什么还要分磷酸化不同的残基呢? 谢谢! zhidanguilai 加拿大Immunechem公司的非放射性蛋白激酶C活性分析试剂盒安全、快速、稳定,可用于筛选蛋白激酶C抑制剂或激活剂、定性定量分析纯化或部分纯化的PKC激酶活性。 测试盒原理: 基于ELISA的基本原理。PKC底物被包被在酶标板上,在ATP存在的前提下,PKC激酶将底物磷酸化,洗掉游离的PKC激酶和其他成分。再加入特异性磷酸化抗体(只识别
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