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双抗体夹心ELISA法检测待测样品sTNF-α含量

双抗体夹心ELISA法检测待测样品sTNF- α 含量   【基本原理】 选用两株针对TNF-α分子不同位点的单克隆抗体，即McAb1 （包被抗体）与McAb2 （酶标抗体）。先用McAb1 包被固相载体，使待测sTNF-α与之特异性结合，然后再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的McAb2 ，则形成McAb1 -sTNF-α -HRP标记McAb2 复合物，再加入HRP底物，则酶催化底物显色，测定样品与标准品光密度值（即OD值），绘制标准曲线，即可从标准曲线中

双抗体夹心ELISA法检测待测样品sTNF-α的含量

1. 96孔酶标板(96孔ELISA板)，酶标测定仪，495nm滤光片。 2. 其他：4℃冰箱，水浴箱，刻度吸管，毛细吸管，加样器(头)等。 实验材料 1. 待测样品：如血清、血浆、尿液、细胞培养上清液等均可用于sTNF-α，后者应作适当稀释。 2. 阴性对照品：未免疫小鼠IgG。 实验步骤 1. 包被：将用包被液稀释好的McAb1 加入96孔酶标反应板，100μl /孔，置37℃温育

间接免疫荧光法检测样品中mIL-2Rα+阳性细胞

，CD25，Tac抗原）脱落进入体液而形成，（是mIL-2R的清除形式之一）。体液中sIL-2Rα升高是抗原强烈刺激的标志以及T淋巴细胞活化的标志。sIL-2R由mIL-2R+ T细胞释放，可存在于血清、尿液及淋巴细胞培养上清液中。应用标记的抗IL-2R特异性抗体和抗原抗体反应可检测待测样品中sIL-2R含量，也可检测mIL-2R。目前多以双抗体夹心ELISA法或ELISA抗原竞争法检测sIL-2R含量，以间接免疫荧光法或放射免疫法检测mIL-2R。   【基本原理】 利用抗