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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
46
- 生长状态:
贴壁
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
成纤维细胞样
- 物种来源:
小鼠
- 组织来源:
眼角mo组织
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
| 细胞名称 | 小鼠角膜基质细胞 | 组织来源 | 眼角mo组织 |
| 商品货号 | YS-01X7477 | 种属来源 | 小鼠 |
| 包被条件 | 换液频率 | 每2-3天换液一次 | |
| 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
| 传代特性 | 可传3代左右 | 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 | 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
| 细胞简介 |
| 小鼠角膜基质细胞分离自眼角mo组织;角膜位于眼球前壁的一层透明膜,约占纤维膜的前1/6,从后面看角膜呈正圆形,从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神经末梢,如有外物接触角膜,眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明,角膜并没有血管,透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层,由前向后依次为:上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。角膜基质层是角膜的主要组成部分,占据角膜厚度的90%,由角膜基质细胞、胶原纤维和细胞外基质构成。角膜基质层缺损的修复主要由角膜基质细胞的增殖及分泌细胞外基质完成。角膜基质层具有结构规整,透明度高的特点,正常情况下角膜基质细胞分泌组成基质层的成分,维持角膜的透明度,此细胞对于角膜损伤的修复具有重要意义。角膜基质细胞,存在于角膜基质层中,在正常情况下,处于静止状态。但当角膜损伤时,不同上皮来源的因子及环境信号,将影响角膜基质细胞的应答反应,决定着角膜能否完全被修复。 |
质量检测:实验室分离的小鼠角膜基质细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
小鼠角膜基质细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,小鼠角膜基质细胞以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
小鼠角膜基质细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样 ,在技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,
37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度
的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内
加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验
器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL
(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
原代细胞培养方法及注意事项:
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
公司正在出售的产品:
| 华北大黑鳃金龟细胞系;QAU-Ho-E-6-22 | 5号染色体开放阅读框36封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞株;HIRRV-G-4D10 | FAM162B蛋白封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞株;JF-CD4-2-1D8 | SPRED2蛋白封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞株;JF-CD4-1-2A10 | 19号染色体开放阅读框44封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞株;YTT-2 | 5-羟色胺受体1A封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞株;2D2-C1 | 肾细胞癌下调蛋白1封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞株;1B5 | Bax封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞株;3F11 | 溶质载体家族25成员42封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞株;TSCD8α-C16 | 血小板源性生长因子A相关蛋白2封闭多肽 |
| 人结直肠癌西妥昔单抗耐药细胞株;NCI-H508/C225 | 原钙粘蛋白γA1封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞株;DAS5G11E7 | 视神经细胞相关蛋白/早老素结合蛋白封闭多肽 |
| 过表达人血清白蛋白的人肝癌细胞系;HepG2N | 表皮细胞表面抗原1/Esa1封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞株;BBBE1H1 | 小鼠角膜基质细胞睾丸蛋白聚糖2封闭多肽 |
| 猪肾上皮细胞;PK15-cyclinAshRNA2 | 线粒体苹果酸脱氢酶2封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞株;TEAF3F3 | 溶质载体家族蛋白35成员D2封闭多肽 |
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原创 SOOF 生物学霸 2022-04-20 17:59 4 月 12 日,江苏集萃药康生物科技股份有限公司开启申购,在公司公开的招股书中显示该公司主营业务为实验动物小鼠模型的研发、生产、销售及提供相关技术服务。部分品系的小白鼠单价高达万元以上,部分品系毛利率更是高达95% 左右。 随后一条「如何看待南大教授靠卖基因敲除小鼠,一只11723元,年赚近4亿」的讨论登上知乎热榜。 图片来源:知乎 作为天坑专业之首的生物,一直以来在大家的印象里总是和辛苦,清贫,回报周期长的标签挂钩
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