- ￥2800 - 6200
- 上海研生
- YS-01X7530
- 国产
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型：
否
- 供应商：
上海研生
- 库存：
28
- 生长状态：
贴壁
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 细胞形态：
梭形、多角形
- 物种来源：
人
- 组织来源：
椎间盘组织
- 规格：
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞名称：人椎间盘纤维环细胞
组织来源：椎间盘组织
商品货号：YS-01X7530
种属来源：人
产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶
包被条件：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：梭形、多角形
传代特性：可传5代左右；3代以内状态最佳
传代比例：1:2
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
细胞简介：
人椎间盘纤维环细胞分离自椎间盘组织；椎间盘是位于脊柱两椎体之，由软骨板、纤维环、髓核组成的一个密封体。上下有软骨板，是透明软骨复盖于椎体上，下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成，位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠，使纤维环成为坚实的组织，能承受较大的弯曲和扭转负荷。纤维环的前侧及两侧较厚，而后侧较薄。纤维环的前部有强大的前纵韧带，后侧的后纵韧带较窄、较薄。纤维环细胞密度为9000个细胞/mm3，其外层的细胞呈梭型，主要属于纤维细胞，内层细胞呈圆形，主要属于软骨细胞。在培养的情况下，用透射电镜观察则有许多共同的超微结构表现，它们的核较圆，核仁较明显。细胞质内可见大量的附有核糖体颗粒的粗面内质网和滑面内质网。细胞质内线粒体多，为椭圆形，有的可看到双层单位膜，由单位膜包绕初级深酶体和次级深酶体。细胞质内有一系列的扁平囊及小泡主成的高尔基复合体和分泌颗粒，纤维环细胞合成分泌蛋白多糖及胶原纤维的能力很旺盛，保证纤维环生理代谢活动所需的构造物质的供给。一但这种供给减少，纤维环的生物性能就会减弱，椎间盘开始退变。
原代细胞试用的实验类型：
原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA，RNA和遗传学研究等，还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验，如下：
一、细胞增殖检测：
常见检测方法：CCK8检测法 ，MTT检测法，Brdu检测法，Edu检测法，平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法：流式检测细胞周期，标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法：流式检测细胞凋亡，线粒体膜电位，活性氧检测，Hoechst染色，电镜，TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法：细胞划痕实验，Transwell实验，Invasion实验
原代细胞培养方法及注意事项：
1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。
3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切：用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500~1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。
7.计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2~7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。
8.培养：置于36.5℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶盖需拧松半圈。
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文献和实验家兔椎间盘(intervertebral disc )细胞的体外培养方法
酶(collagenase) 200U/ml 0.4%台盼兰、0.25胰蛋白酶Method 1 组织块法1、取材：空气栓塞法处死家兔后，在无菌状态下获取家兔椎间盘组织。置于准备好的DMEM培养基（含双抗）。迅速带回到无菌超净台上。（注意事项：椎间盘位于相邻两个椎体之间，取材过程较为繁琐，要求动作迅速，争取在家兔死后半小时内完成，否则，该组织对缺氧耐受性差导致培养失败）。2、剪切：在超净台上，进一步将周围组织分离，用Hank’s液冲洗数遍，直到冲洗液透明为止。眼科剪刀将组织修剪为1~2cm3大小的小组织块，Hank’s
丁香园网友clellwei的观点为：原代椎间盘细胞培养其实并不太难，但培养时间相对较长，所以容易出问题。1、选材很关键选用胎儿椎间盘进行原代培养相对容易一些，可利用反复传代的方法来制作退变模型。直接选择人退变椎间盘进行培养时（一般选择手术摘除的椎间盘），患者的年龄及间盘的退变情况必须充分考虑在内。若年龄偏大，间盘退变很严重，培养的难度相应增大。20－50岁之间的患者都可采用。如果实验需要进行纤维环和髓核细胞的分别培养，在取回间盘时需仔细分离。2、操作需仔细原代培养的过程并不太复杂，从取回间盘
腰椎间盘突出切除术 腰椎间盘突出症是腰腿痛的常见原因。在腰椎间盘退变的基础上，腰部的损伤易使髓核及破损的纤维环组织向后突出，压迫神经根而引起一系列的临床表现。但引起坐骨神经痛的原因是多种的，有时诊断比较困难。临床有将腰椎结核或其他疾病误诊为间盘突出而施行手术的；也有术前诊断为间盘突出，而术中却无所发现；虽然部分病例可以用髓核在麻醉下自行回缩来解释，但也说明诊断的复杂性；另外椎管、隐窝、根管狭窄更增大诊断的难度，还须除外肿瘤、畸形等等其他疾患。因此，术前必须详细检查
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