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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
37
- 生长状态:
贴壁
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
神经元细胞样
- 物种来源:
大鼠
- 组织来源:
嗅球组织
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
一、基本信息
方法简介:实验室分离的大鼠嗅球神经元细胞采用组织贴块法并结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的大鼠嗅球神经元细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
大鼠嗅球神经元细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,大鼠嗅球神经元细胞以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
大鼠嗅球神经元细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈神经元细胞样 ,在技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,
37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度
的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内
加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验
器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL
(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。


原代细胞培养方法及注意事项:
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的
混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒
入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化
时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即
终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,
加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在
7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
公司正在出售的产品:
| 细胞名称 | 大鼠嗅球神经元细胞 | 组织来源 | 嗅球组织 |
| 商品货号 | YS-01X7576 | 种属来源 | 大鼠 |
| 包被条件 | PLL(0.1mg/ml) | 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 神经元细胞样 |
| 传代特性 | 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群 | 消化液 | 0.125%胰蛋白酶 |
| 培养基 | 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 | 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
| 细胞简介 |
| 大鼠嗅球神经元细胞分离自嗅球组织;嗅球是脊椎动物前脑结构中参与嗅觉的部分,用于感知气味。嗅球分为二个不同的结构:主嗅球及辅助嗅球。在大脑额叶来自许多嗅细胞的神经纤维缠集在一起,形成线球状的部分。在这里,纤维与多个次级神经元——僧帽细胞的树突相连接,进而由这里伸出神经纤维形成嗅囊,终止于额叶下方。一般认为它在嗅味的辨别中具有重要的功能。对于大部份的脊椎动物而言,嗅球位在大脑的前面,不过人的嗅球位于大脑的内部。嗅球由筛骨的筛板固定且保护嗅球,哺乳动物的筛板会分隔嗅球和嗅上皮,而嗅神经会穿过筛板中的筛孔而连接到嗅球。嗅球分为二个不同的结构:主嗅球及辅助嗅球。 |
质量检测:实验室分离的大鼠嗅球神经元细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
大鼠嗅球神经元细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,大鼠嗅球神经元细胞以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
大鼠嗅球神经元细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈神经元细胞样 ,在技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,
37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度
的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内
加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验
器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL
(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。


原代细胞培养方法及注意事项:
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的
混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒
入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化
时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即
终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,
加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在
7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
公司正在出售的产品:
| 长尾绿猴肾细胞 | 富含亮氨酸重复蛋白34封闭多肽 |
| 袋鼠肾细胞 | SH3TC1蛋白封闭多肽 |
| 负鼠肾细胞 | 狂病毒糖蛋白封闭多肽 |
| 猪胚胎睾丸传代细胞 | 孕激素受体膜相关元件封闭多肽 |
| 人胸腺激酶缺陷细胞 | EMID2蛋白封闭多肽 |
| VERO细胞衍生株 | 线粒体铁转运蛋白2封闭多肽 |
| 鲤鱼尾鳍细胞 | 血管内皮生长因子受体1封闭多肽 |
| 草鱼肾细胞 | Cullin3封闭多肽 |
| 大鼠脊髓背角神经细胞 | 钙激活钾通道蛋白β2封闭多肽 |
| 人肾皮质近曲小管上皮细胞 | CD83封闭多肽 |
| PG13 逆转录病毒包被的TK-NIH3T3细胞 | 重组人CD3E蛋白 |
| 人急性T细胞白血病细胞 | 神经营养因子-3前蛋白封闭多肽 |
| 牛骨骼肌卫星细胞 | 大鼠嗅球神经元细胞Kelch样蛋白36封闭多肽 |
| 人脐静脉细胞融合细胞 | 泛素D封闭多肽 |
| 梅花鹿干扰素-γ单克隆抗体细胞 | 共济失调蛋白7样1封闭多肽 |
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文献和实验相关实验
, 硒(172.94) 0.224umol/L,0.04ug/ml 3,3',5-L-三碘甲状腺原氨酸(672.96) 0.49umol/L,0.33ug/ml 1.2 实验方法 1.2.1 脱颈处死大鼠幼仔,固定在手术板上,用75%乙醇喷洒头部皮肤消毒 1.2.2 剪去头部皮肤,然后作环形切口,除去颅盖,在鼻尖处显露脑和两个嗅球 1.2.3 从脑部轻轻取下嗅球,用PBS清洗2~3遍,除去血块和毛细血管等 1.2.4 剪碎组织块,用浓度为0. 125 %的胰蛋白酶37 ℃
1. Wistar 大鼠血细胞计数 2. SD 大鼠血细胞计数
+20%FBS)并吹打成单细胞悬液。7、细胞计数,调整细胞密度按1.5×105/cm2种入6孔板内,放入CO2孵箱中培养。培养48h后换液并加入Ara-C使其终浓度为1×10-5mM/L。Ara-C作用24h后全量换液。以后每隔3天半量换液一次。【注意以下几点】1、上面的步骤是传统方法。有许多地方可以进行改动:如消化时可以直接用0.125-0.25的胰酶消化15-20min左右,也可用DNA酶进行消化,有人还直接进行吹打,都可行。2、上面虽然时大鼠皮层神经元,但是同样适用于小鼠,但是应该选择 孕
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