碧云天生产的Masson三色染色试剂盒(Masson's Trichrome Staining Kit),也称Masson染色试剂盒(Masson Staining Kit)、结缔组织染色试剂盒(Connective Tissue Stain Kit)、三色染色试剂盒(Trichrome Stain Kit或Trichromic Staining Kit)或Masson-Goldner Staining Kit,是一种通过经典方法简单、高效、灵敏地可染色细胞核并选择性地对胶原纤维(Collagen fiber)和肌纤维(Muscle fiber)进行染色的试剂盒。本试剂盒对不同组织的石蜡切片和冰冻切片均适用。
Masson三色染色又称马松染色,简称Masson染色,是结缔组织(Connective tissue)染色最经典的一种方法,也是区分胶原纤维和肌纤维权威而经典的技术方法,对于组织学研究和疾病的病理诊断有着重要意义。胶原纤维由胶原蛋白经过特殊排列而形成,起着重要的结构支持和强度维护的作用,是许多组织的主要成分之一,特别是在结缔组织中广泛存在。肌纤维包含有肌球蛋白和肌原纤维,负责肌肉的收缩和运动。各种原因引起的组织细胞损伤,可导致组织细胞发生变性、坏死和炎症反应,损伤较小的情况下可完全恢复正常结构和功能,但如果损伤严重,则会发生纤维化(Fibrosis),即纤维大量增生填补组织缺损,却无法恢复正常的结构和功能[1]。通过Masson染色可以分析组织中胶原纤维的数量和分布,评估组织的纤维化程度;帮助鉴别组织中的炎症细胞和炎症相关的纤维化变化[2];显示肿瘤周围或内部的纤维组织反应和结构,辅助判断和诊断肿瘤类型和分级[3]。
本试剂盒的染色原理如下。Masson染色通过使用苏木素、亮绿以及丽春红-酸性品红三种阴离子染料,选择性地对细胞核、胶原纤维和肌纤维进行染色。染色时根据组织不同的渗透性,不同组织可被分子大小不同的阴离子染料着染,显示不同的颜色。而组织的渗透性取决于组织的结构密度。不同的组织和细胞成分具有不同的孔隙大小,如孔隙小,组织结构致密,渗透性低;孔隙宽,组织结构疏松,渗透性高。小分子量的染料易穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量的染料则只能进入结构疏松、渗透性高的组织。例如已固定的组织经Masson染色,红细胞、细胞核等被最小分子的阴离子染料苏木素着染,显紫色;肌纤维、胞浆等被中等大小的阴离子染料丽春红-酸性品红染色,显红色;而胶原纤维等则被大分子的阴离子染料亮绿着染,显绿色[4]。
本试剂盒组分齐全,提供了Masson染色所需的苏木素染色液、酸性分化液、丽春红-酸性品红染色液、亮绿染色液及磷钨钼酸分化液,用户只需自备各梯度浓度的乙醇溶液即可完成整个实验过程。
本试剂盒操作简捷,性能稳定,分化时间短,显色清晰,所染切片保存时间长且不易褪色,用于大鼠胃部石蜡切片的染色效果参考图1。
图1.碧云天Masson三色染色试剂盒(C0189)用于大鼠胃部石蜡切片的染色效果图。图中可见基底膜胶原纤维被亮绿染成绿色,胞浆被丽春红-酸性品红染成红色,细胞核被苏木素染成紫黑色。实际染色效果会因样品、检测条件的不同而略有差异,本图仅供参考。
按照使用说明推荐用量,即每张切片使用50μl染色液体系计算,本试剂盒小包装可进行100次染色,中包装可进行500次染色。
包装清单:
保存条件:
室温保存,一年有效。
注意事项:
请勿-20ºC冻存,否则可能会有沉淀析出,影响使用效果。
丽春红-酸性品红染色液遇水易脱色,染色后用蒸馏水润洗不能超过10秒。
磷钼酸分化液与酸性分化液的使用次序不能颠倒。磷钼酸分化液一方面可以使被丽春红-酸性品红染色液染上红色的胶原纤维分化成无色或淡红色,而肌纤维等仍呈鲜红色;另一方面对胶原纤维又起媒染作用,使胶原纤维与大分子染料亮绿更易结合。磷钼酸分化液分化后无需水洗。
亮绿染色液染色后使用酸性溶液分化的目的是除去原浆中的绿色,使染色鲜艳清晰,推荐分化时间为1分钟,可根据染色效果自行调整。
酸性分化液为易燃液体,须密闭储存于阴凉、干燥、通风良好的地方,建议存放在易燃液体的专用安全柜中,并远离明火、火花、热源、热表面,禁止吸烟。
酸性分化液有腐蚀性,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或腐蚀其他物品。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。