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文献和实验内换液彻底清除,避免影响细胞状态。 2. 标准化实操流程 铺板操作规范:细胞团均匀滴加至孔板,十字轻柔晃动(前后、左右小幅移动),禁止打圈摇晃,避免细胞全部聚集孔板边缘。放培养箱时轻拿轻放。 单克隆挑取技巧:弃去原有培养基,沿孔壁缓慢加入DPBS缓冲液,轻柔洗涤1-2次以去除死细胞和碎片,最后更换为新鲜培养基。 倾斜孔板使克隆暴露,使用10μL无菌枪头轻刮克隆,吸取细胞团,动作轻柔以防细胞分散。将吸取的细胞团转移至含基质胶的12孔板中,轻微晃动孔板使细胞均匀分布,放回培养箱。 换液标准
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(200mg/l). - Incubate at 30°C for two to three days. *This step reduces background by eliminating aborted transformants. 2. Zymolyase treatment - Transfer a small portion of a well-isolated colony (~1 mm) into 50 µl solution
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