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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
34
- 检测方法:
微量法、可见分光光度法
- 规格:
100管/96样/50管/48样
| 规格: | 100管/96样 | 产品价格: | ¥290.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50管/48样 | 产品价格: | ¥150.0 |
测定意义
GSH/GSSG是细胞内最重要的氧化还原对之一。因此,测定细胞内GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。
测定原理
DTNB与GSH反应生成复合物,在412nm处有特征吸收峰;其吸光度变化与GSH含量成正比。
实验中所需仪器及设备
可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1ml比色皿、双蒸水
商品属性:
| 产品名称 | 还原型谷胱甘肽(GSH)测试盒 |
| 规格 | 100管/96样 50管/48样 |
| 测试方法 | 微量法、可见分光光度法 |
| 货号 | LZ-S0128 |
注意事项:
1.阳性对照H2O2一般使用浓度为100 μM (推荐浓度50-200 μM,具体依细胞类型而定) 。通常刺激后30 min-4 h可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞,活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后30 min内观察不到活性氧的升高,可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果荧光信号过强,可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。
2.实验过程中,如果阴性对照细胞荧光也比较强,可以按照1:2000-1:5000 稀释荧光探针DCFH-DA,使DCFH-DA的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间可在15-60 min 内适当进行调整,尽量缩短读片时的曝光时间,并且试验组、对照组曝光时间需保持一致。
活性氧阳性对照 (H2O2) 仅仅用于作为阳性对照的样品,并非所有试验组样品中都需加入活性氧阳性对照。
3.探针装载后,一定要洗净未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。
| 柱式粪便 RNAout50 次 | HAVCR2重组小鼠 TIM3 / HAVCR2 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉汤(TSB-YE)颗粒 | CD70重组大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (His 标签) Protein |
| 尿道上皮细胞生长因子5mL | VSIG4重组小鼠 VSIG4 蛋白 (His 标签) Protein |
| IPTG 干粉2.5g | CXADR重组小鼠 CXADR / CAR 蛋白 Protein |
| 暗盒 (5×7 英寸 )1个 | IDO2 Protein Human 重组人 IDO2 蛋白 (His 标签) |
| 柱式质粒 DNAout100 次 | DCTPP1 Protein Human 重组人 XTP3TPA / DCTPP1 蛋白 (His 标签) |
| 桔汁琼脂 | C1QB Protein Human 重组人 C1QB / C1qB 蛋白 (His 标签) |
| 麦芽汁琼脂 | NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 标签) |
| 即用型无菌瓶装液体培养基 | AMICA1重组人 JAML / AMICA 蛋白 (His 标签) Protein |
| 改良LETHEEN琼脂基础 | EGFL6重组人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白 (His 标签) Protein |
| L-Cysteine | FAM3D重组人 FAM3D 蛋白 (His 标签) Protein |
| N-Acetyl-L-Glutamic acid | 还原型谷胱甘肽(GSH)测试盒CADM1重组人 SynCam / CADM1 / TSLC1 / IGSF4 蛋白 (His 标签) Protein |
| ECH Sepharose 4B | ASO |
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文献和实验GSH和GSSG 参照 Anderson等 (1992)。取0.5 g样品,加入3 mL冰冷的6%的偏磷酸(含1 mmol•L-1 EDTA , pH 2.8),冰浴研磨,匀浆液以20,000 g,4 ℃离心15 min,取上清液来马上测定GSH和GSSG的含量或储存在-20 ℃下等待测定。总的GSH和GSSG含量测定如下:200 μL提取液加 1.2 mL反应液包含400 μL反应液1(110 mmol•L-1 Na2HPO4•7H20, 40 mmol•L-1 NaH2PO4•H2
「参考值」 高铁血红蛋白还原75%以上。 「临床意义」 红细胞内6-磷酸葡萄糖脱氢酸酶(G-6PD)在磷酸戊糖旁路糖代谢中能使6-磷酸葡萄糖变为6-磷酸葡萄糖酸,同时使三磷酸吡啶核苷(TPN)变成还原型三磷酸吡啶核苷(TPNH),TPNH可使氧化型谷胱甘肽(GSSG)变成还原型谷胱甘肽(GSH)并使高铁血红蛋白(HbFe+++)还原成低铁血红蛋白(HbFe++)。本试验用亚硝酸钠使HbFe++氧化为HbFe+++(暗棕色)以美蓝的递氢作用加强磷酸戊糖旁路的糖
内许多氧化还原反应中有重要作用。例如,许多酶的活性基团是巯基(—SH),维生素C能够维持—SH处于还原状态而保持酶的活性;维生素C可以使氧化型谷胱甘肽转变为还原型谷胱甘肽(GSH),使机体代谢产生的过氧化氢(H2O2)还原;维生素C还可保护维生素A、E及某些B族维生素免受氧化。因此,运用谷胱甘肽时,与维生素C并用,能够提高其功效。 目前,人工已研制开发出了谷胱甘肽药物,广泛应用于临床,除利用其巯基以螯合重金属、氟化物、芥子气等毒素中毒外,还用在肝炎、溶血性疾病以及角膜炎、白内障和视网
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