无内毒素Strep tagII Benzonase核酸酶

描述：

Benzonase 核酸酶是来自 Serratia marcescens, 经基因工程改进的核酸内切酶。它能降解所有形式(包括单链，双链，
线性和环状)的 DNA 和 RNA 而没有蛋白裂解活性，在广泛条件范围具有很高的特异性。它将核酸完全消化成 3-5 碱基长度
（杂交限度以下）的 5’-单磷酸寡核苷酸，最适合从蛋白中去除核酸的操作，符合 FDA 关于核酸污染的处理规程。Benzonase
核酸酶迅速水解核酸的能力使该酶成为降低粘度以减少处理时间和增加蛋白产量的最佳选择。
Strep-tag II Benzonase 核酸酶融合了 Strep-tag II 标签（WSHPQFEK），使得在完成核酸消化后，方便的去除 Benzonase。
 生产的 Strep tagII Benzonase 核酸酶可于 Strep Tactin XT Resin牢固的结合。由于 Strep
Tactin XT Resin 和 Strep Tactin Resin 相比，其配体偶联牢固，不会造成蛋白脱落，因此通常在含有微量 Strep-tag II
Benzonase 核酸酶的制品中，一步即可去除>98%的核酸酶污染，而 Strep Tactin Resin 无法达到。
 生产的无内毒素级的 Benzonase 核酸酶，内毒素含量<40EU/mL（按照单位换算量计算为，每 1000U 中含有的内毒素<0.15EU），其指标符合 FDA 的指定标准。

货号	产品名称	规格
XG-P3080	无内毒素Strep tagII Benzonase核酸酶	25KU
XG-P3080	无内毒素Strep tagII Benzonase核酸酶	100KU
XG-P3080	无内毒素Strep tagII Benzonase核酸酶	5000ku

单位定义：在 30 分钟内使△ A260 值降低 1.0(相当于完全消化 37 μg DNA )的酶量定义为一个活性单位。
注意：含大量蛋白、细胞壁、其它盐分的粗制品，对该酶有部分抑制作用，使用时需要增加酶的用量。
应用：蛋白提取时去除核酸污染：2D 凝胶电泳：Western Blot：生物制药；疫苗制备
储存：置于-20°C 保存。

PCR反应条件优化：
1、变性温度和时间：
无内毒素Strep tagII Benzonase核酸酶保证模板DNA解链完全是保证整个PCR扩增成功的关键。加热90~95°C, 30~60s，再复杂的DNA 分子也可变性为单链。温度过高或高温持续时间过长，可对Taq酶活性和dNTP分子造成损害。
2、复性温度和时间:
PCR扩增特异性取决于复性过程中引物与模板的结合。复性温度越高，产物特异性越高。复性温度越低，产物特异性越低。需根据引物的Tm值具体设定。
3、延伸温度和时间:
一般位于Taq酶最适作用温度70~75°C之间。引物小于16个核苷酸时，过高的延伸温度不利于引物与模板的结合，可以缓慢升温到70~75°C。延伸反应时间，可根据待扩增片段的长度而定，小于1kb, 1min足够；大于1kb需加长延伸时间。Taq酶可根据1kb/min增加时间。这里需要注意，延伸时间过长可能出现非特异扩增。因此需要设置恰到好处的延伸时间。
4、循环数:
其他参数选定后，PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。理论上说20〜25次循环后，PCR产物的积累即可达到最大值，实际操作中由于每步反应的产率不可能达到100%，因此不管模板浓度是多少，20~30次是比较合理的循环次数。循环次数越多，非特异扩增增加。
 

  降落PCR与温度梯度PCR的区别：
降落PCR与温度梯度PCR都是对反应体系中的退火温度进行优化，但两者在原理上有所不同。
温度梯度PCR是为了找到最适的退火温度，设置不同的退火温度进行多管PCR，将其分别放置在PCR仪中的不同温度模块进行反应，最终找到最适的退火温度，并进一步以此退火温度进行普通PCR扩增。
降落PCR是为了提高反应的特异性，通过设计一系列不断降低的退火温度，在同一PCR管内进行PCR扩增，最终获得大量的特异性扩增产物。
与温度梯度PCR相比，降落PCR更有优势。温度梯度PCR需要多次反应或多管反应找到最适的退火温度，之后还需以找到的最适退火温度再次进行PCR，才能得到较好的扩增效果，操作比较繁琐。降落PCR只需一次反应就可以获得很好的扩增效果，避免了对每对引物进行最适退火温度的优化和测定工作。
降落PCR适用于不确定引物的最适Tm值，或引物扩增效果不佳时，不了解目的模板同源性程度，使用降落PCR可以快速、特异的得到目的扩增片段。根据不同实验的需要，降落PCR还可与其它PCR方法同时使用，如实时定量降落PCR、竞争降落PCR等。
 

PCR的特点：
特异性强：使用两对引物进行扩增提高了特异性，第一轮PCR中由外引物错配产生非特异性产物，同时在第二轮PCR中内引物与错误片段配对扩增的概率极低，降低了扩增多个靶位点的可能性。
灵敏度高：进行两轮PCR扩增，可以执行更多的循环，从低拷贝样本中扩增得到足量的产物，克服了单次扩增平台期限制，提高PCR的灵敏度。

 
公司正在出售的产品：

葡萄状穗霉属通用染料法荧光定量PCR试剂盒	松弛素ELISA试剂盒 RLN免费代测试剂
猪轮状病毒D群探针法荧光定量RT-PCR试剂盒	FK506结合蛋白12雷帕霉素关联蛋白ELISA试剂盒 FRAP免费代测试剂
人副流感病毒型PCR检测试剂盒	抗甲型肝炎病毒抗体IgMELISA试剂盒
铅黄肠球菌PCR检测试剂盒	G-CSF
大片吸虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒	IV形胶原蛋白α3链ELISA试剂盒
熊源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒	Ly6/神经毒素1ELISA试剂盒
衣原体通用PCR检测试剂盒	M-期磷蛋白8ELISA试剂盒
大肠杆菌(O139)PCR检测试剂盒	Neurensin2蛋白ELISA试剂盒
大豆源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒	N-甲基-D-天冬氨酸受体ELISA试剂盒
伊氏锥虫(TE)PCR检测试剂盒(荧光-PCR法)	Pim-2原癌基因ELISA试剂盒
车前子染料法PCR鉴定试剂盒	人氧还原蛋白过氧化物酶4(PRDX4)试剂盒ELISA
杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒	人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISAelisa试剂盒
禽腺病毒（8b型）探针法荧光定量PCR试剂盒	无内毒素Strep tagII Benzonase核酸酶人细胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)ELISA检测试剂盒
卡奇谷病毒PCR检测试剂盒	大鼠淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA试剂盒
传染性肌肉坏死病病毒PCR检测试剂盒	大鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒