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无内毒素高纯质粒小量快速提取试剂盒

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  • 西格
  • XG-P2727
  • 国产
  • 2025年07月11日
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      12 个月

    • 供应商

      上海西格

    • 保存条件

      2-8°C

    • 规格

      50 次

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    XG-P2727 无内毒素高纯质粒小量快速提取试剂盒 50 次

    产品细节图片1
    保存条件:本产品收到后按照上面指示温度存放各成份,储存18个月不影响使用效果。
    产品介绍:
    本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,粗提物通过过滤柱除去内毒素,然后离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
    产品特点:
    1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
    2.独有的去蛋白液配方,可以高效去除核酸酶。即使是核酸酶含量丰富的菌株如JM系列、HB101也可以轻松去除。有效防止了质粒被核酸酶降解。
    3.独特内毒素清除方法,清除内毒素效果一般小于<0.1 EU/μg。

    PCR反应基本步骤:
    一般的聚合酶链式反应由20到35个循环组成,每个循环包括以下3个步骤:
    变性(Denaturation):
    利用高温(93-98℃)使双链DNA分离。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前,通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离,仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟,接下来PCR仪就控制温度进入循环阶段。
    退火或称接合,复性(Annealling)
    在DNA双链分离后,降低温度使得引物可以结合于单链DNA上。此阶段的温度通常低于引物熔点5℃。错误的退火温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。
    延伸(Extension):
    DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。传统的Taq估计合成1000bp/min、较新的Tbr(来自于嗜热菌Thermus brockianus)约40秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。

    产品细节图片2
    PCR 反应需要使用哪些试剂?
    一、模板DNA:PCR反应需要模板DNA,如从细胞、组织、血液中提取DNA等;
    二、引物:PCR反应的两个引物,分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域,引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物;
    三、dNTPs:PCR反应中需要四种dNTPs,包括脱氧腺苷酸(dATP)、脱氧胸苷酸(dCTP)、脱氧鸟苷酸(dGTP)、脱氧胞嘧啶酸(dTTP),用于细胞分裂、DNA合成等生物学过程,用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增;四、Taq DNA聚合酶:PCR反应需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等,用于扩增DNA链;
    五、PCR buffer溶液:对PCR反应具有缓冲作用,调节反应pH,硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛,可增强PCR反应特异性,从而提高反应效率;
    六、酶切体系:PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤,常常需要进行酶切操作。
    七、MARK:一种分子量标准,用来判别DNA片段大小的工具。
    八、DNA纯化试剂盒:用于纯化PCR反应产物;
    产品细节图片3
     
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