- ￥2500
- 邦景
- BJ-X1007
- 国产
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型：
人细胞系
- 供应商：
上海邦景
- 库存：
20
- 生长状态：
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞：
是
- 物种来源：
人
- 规格：
1×10^6cells
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| U251 MG/TMZ人类星形胶质瘤耐替莫唑胺细胞 | 1×10^6cells | BJ-X1007 |
一、实验前准备工作
1、提前24h取12mL DMEM(abs9483)和RPMI 1640(abs9484)完全培养基（含10%FBS(abs972)，下同）于50mL离心管内，置于4℃冰箱中预冷；
2、将分装好的Matrigel基质胶(abs9490)提前24h从-20℃放入4℃，使其融化成液体状态；
3、将无菌的1mL移液器枪头放入无菌50mL离心管内，置-20℃冰箱预冷。
二、琼脂糖包被96孔板
1、准确量取6mL RPMI 1640培养基（或DMEM培养基）于2个10mL的注射玻璃瓶内，加入90mg琼脂糖(abs44056213)，盖塞后放入80℃的水浴锅内加热溶解30min；
2、加热结束后，将注射瓶放入灭菌锅内，115℃灭菌30min；
3、灭菌完成后，迅速取出注射瓶放入超净台内。将注射瓶内的琼脂糖溶液倒入无菌的加样槽中，用多通道移液器以每孔60μL的量加入96孔板内。注意：由于琼脂糖溶液在室温时会凝固，因此从灭菌锅内取出琼脂糖溶液后
一定要快速转移至超净台内并迅速加入至96孔板中。此外，为保证加样时琼脂糖不冷却，需要同时灭菌加样槽和100μL的移液器枪头。
4、加入完成后，96孔板要保持水平约30min使孔内的琼脂糖凝固。
选择培养基没有一定的标准：
(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献，或在购买细胞株时咨询。
(2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试，许多培养基可以适合多种细胞。
(3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640
(4)用多种培养基培养目的细胞，观察其生长状态，可以用生长曲线、集落形成率等指标判断，根据实验结果选择最佳培养基，这是最客观的方法，但比较繁琐。
如何正确地使用细胞系？
首先做好细胞系的保存，尽量多的保存早期分裂增殖的细胞系。因为随着传代次数增多，细胞系的稳定性下降，遗传物质，细胞形态，倍增时间等都可能发生改变。其次，熟悉所用细胞系的增殖和生长特点，熟悉它对营养物质的需求。比如，倍增时间，培养液需求特征，血清浓度要求等等。最后，定期做好细胞系鉴定工作，尤其是从外部借来使用的细胞系，要求其遗传谱图与细胞库中的一致。这点关系到你研究研究结果的可靠性和可重复性。
细胞系的用途有哪些？
1、科学研究：药物研究开发与基础研究药物研究与开发
（1）新药筛选：如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。
（2）疫苗研究与开发：如病毒性疫苗的研究与开发（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等）、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
（3）基因工程药物研究与开发：如干扰素研究与开发，细胞生长因子研究与开发等。
（4）细胞工程药物研究与开发：生物活性多肽研究与开发，人参皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究与开发。
（5）单克隆抗体制备：包括诊断用单克隆抗体，治疗用单克隆抗体。
基础研究
（1）药物作用机理
（2）基因功能
（3）疾病发生机理
2、生物制药
（1）疫苗生产：如病毒性疫苗（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等）、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
（2）基因工程药物生产：如在临床医学中具有治疗价值的一些细胞生长因子如干扰素、粒细胞生长因子、胸腺肽等。
（3）诊断用和药用单克隆抗体生产。
（4）细胞工程药物生产：生物细胞内的一些生物活性多肽，生物活性物质等。
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Cinchonine辛可宁 度：≥98%
5HT7 Receptor： 5-羟色胺受体7抗体 0.2ml
E2F5： 转录因子E2F-5抗体 0.1ml
金属蛋白酶组织抑制因子-1抗体 Anti-TIMP-1 0.1ml
Anti-TNF-alpha/FITC 荧光素标记坏死因子-α抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-KLF5(Ser272) 0酸化KLF5抗体 规格 0.1ml
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GGA1： γ-衔接蛋白相关蛋白1抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh ACTH (18-39) 促皮质激素ACTH(18-39)抗体 规格 0.1ml
Anti-MCP-1/FITC 荧光素标记巨噬细胞趋化蛋白-1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh IgG/Bio 生物素标记的兔抗IgG 规格 0.1ml
Anti-rInsulin /FITC 荧光素标记抗重组人胰岛素抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
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文献和实验Nature 重磅：新发脑胶质瘤疫苗初见成效，瞄准肿瘤「阿喀琉斯之踵」
胶质瘤，顾名思义，是一种由神经胶质细胞恶化发展而来的中枢神经系统肿瘤，是目前发病率最高的原发性颅脑肿瘤。据美国脑肿瘤注册中心（Central Brain Tumor Registry of the United States，CBTRUS）统计，胶质瘤约占所有中枢神经系统肿瘤的四分之一，占所有颅脑恶性肿瘤的 80%。胶质瘤具有侵袭性生长的特点，虽然手术治疗仍是首选，但难以根治，很容易复发。手术联合放疗及替莫唑胺为主的化疗是目前临床上主要的治疗方案，但是效果并不理想。 自 2008 年
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问：手上有U251细胞，pEGFP载体，现在将不带外源基因的载体转u251的效率都很低，10%都没有。所用转染试剂：invitrogen的Lipofectamine 2000和威格拉斯的Vigofect，效率都很低，试过不同细胞密度，不同的DNA和转染试剂的比值，还是不行。各位高人有没有什么建议，另外转染的时候使用有血清的培养基养细胞，不知道影响大不大（说明书上说没有影响），稀释DNA和转染试剂是无血清的培养基，还有就是细胞是很久以前的了，传代较多不知道行不行。答：lipo最好
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