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- 2026年05月28日
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- 文献和实验
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- 供应商：
麦格生物
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现货
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/
- 规格：
96支/盒，10盒/大盒，5大盒/箱
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文献和实验） 二， 准备工作 8， 实验器具与材料： （1）移液枪：200ul、10ul （2）吸头：200ul、20ul （3）吸头台：放置200ul和20ul的吸头一个 （4）EP管1.5ml、100ul 2，实验器具的处理与准备 (1) 塑料制品：（包括吸头、EP管等） 送至高压3次，试验前将枪头放入吸头台。 3, 试剂配制和准备： (1) 双蒸水： 100ml盐水瓶内装40ml蒸馏水，送至高压，后分装到几个1.5mlEP管中，-20℃中保存备用。 (2) PCR中所
质粒的菌悬液 20ul 于 20mL 含氨苄青霉素（ 100μg/mL ）的 LB 培养基中培养， 37℃ 培养过夜。 2. 取 1. 0 mL 细菌培养物，加入 1. 5ml 离心管中， 8,000 r/min 离心 1 min 。 3. 除净上清，加 100μL 溶液 I ，用涡旋仪振荡混匀。 4. 加 200 μL 溶液 II （现用现配），盖紧管盖，迅速颠倒混匀，作用时间不要超过 5min 。 5. 加 150 μL 冰冷的溶液 III （冰上预冷），盖紧
下厌氧培养 24 h。3. DNA 模板制备及浓度测定 取1.4 ml TPGY 培养物转移到 1.5 ml 离心管中，14000 r/min 离心 2 min，弃去上清液。沉淀使用商品化细菌基因组 DNA 提取试剂盒提取 DNA，按照试剂盒说明书进行操作。提取的 DNA 进行纯度和浓度测定后置于 -20 ℃ 保存。4. PCR 扩增 采用分别针对 A、B、E、F 型肉毒梭菌肉毒毒素基因设计的型特异性引物（见附表1），进行多个 PCR 扩增，每个 PCR 反应管检测一种类型的肉毒
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