- ￥300
- 联祖
- LZ-S01139
- 国产
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海联祖
- 库存：
36
- 检测方法：
差速离心法
- 规格：
50管/48样
| 产品名称 | 线粒体分离和线粒体酶提取测试盒 |
| 规格 | 50管/48样 |
| 测试方法 | 差速离心法 |
| 货号 | LZ-S01139 |
商品介绍：
测定意义
线粒体是半自主性细胞器，不仅是细胞内氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷（ATP）的主要场所，为细胞的活动提供能量，而且在许多生命活动中具有重要调控作用。因此，准确和全面分离保持正常活性的线粒体已经成为许多研究的前提。
测定原理：
利用专门试剂温和匀浆组织和细胞，再采用差速离心法从匀浆中分离完整线粒体；利用专门试剂，配合超声波破碎线粒体，可以得到保持活性的线粒体酶。
需自备的仪器和用品：
超声波破碎仪、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
注意事项：
1.阳性对照H2O2一般使用浓度为100 μM （推荐浓度50-200 μM，具体依细胞类型而定） 。通常刺激后30 min-4 h可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞，活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后30 min内观察不到活性氧的升高，可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果荧光信号过强，可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。
2.实验过程中，如果阴性对照细胞荧光也比较强，可以按照1:2000-1:5000 稀释荧光探针DCFH-DA，使DCFH-DA的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间可在15-60 min 内适当进行调整，尽量缩短读片时的曝光时间，并且试验组、对照组曝光时间需保持一致。
活性氧阳性对照 (H2O2) 仅仅用于作为阳性对照的样品，并非所有试验组样品中都需加入活性氧阳性对照。
3.探针装载后，一定要洗净未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
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文献和实验.5% sucrose）。6. Nuclei were sedimented in a Sorvall centrifuge for 30 s at 14 000 rpm.7. The pellet was resuspended in lysis buffer and stored in small aliquots at -80℃。8. The supernatant was saved and used for mitochondrial purification.三、分离纯化线粒体
材料 植物的任何组织都可以作为提取线粒体的材料，但是从线粒体提取的产率、纯度等方面考虑，某些特殊的植物组织更适合用于线粒体的分离。 ( 1 ) 非光合的肉汁饱满的植物块根或块茎组织适合用于大规模的线粒体分离提取。但是相对产率较低（5~10 kg 新鲜组织只能提取约 300 mg 线粒体蛋白质，即 30~60 μg/g 鲜重）。这类植物主要有土豆、红薯、萝卜及甜菜等。 ( 2 ) 黄化苗的各种组织，如胚轴、子叶、根及胚芽鞘，因为叶绿体少，酚类化合物也远低于绿色组织部分，用来提取
玛利乐乐 检测cyt－c是提取细胞总蛋白做western blot。我看很多帖子都说提取的总蛋白里面的基本都是胞浆的cyt－c，线粒体中的一般提取不到。所以就是代表胞浆中的。 roy2929 不知道你看了哪些帖子这么说的。。我看文献上都是分离后分别检测的。要看到线粒体里的少了 胞浆里的多了才能说是释放。就算你说的没错，这么做也不能说服审稿人吧 redbri 楼上说的cyt c的检测有道理，应该要有线粒体和胞浆
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