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100
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信帆生物
(分光光度法 50T/48 样)
一、测定原理:
利用 80%乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开,进一步采
用酸水解法分解淀粉为葡萄糖,再用蒽酮比色法对葡萄糖进行定
量,从而计算出相关淀粉的含量。
二、测定意义:
淀粉是植物中糖的主要储存形式,其含量测定对于评价食品
营养价值和调查植物体内糖代谢都有重要意义。
三、试剂组成:
试剂一:50mL×1 瓶,无色透明液体,4℃保存;
试剂二:30mL×1 瓶,无色透明液体,4℃保存;
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加入 7.5mL 蒸馏
水,然后缓慢加入 42.5mL 浓硫酸,边加入边搅拌,
充分溶解,避光保存;
试剂四:标准品粉剂 10mg×1 瓶,4℃保存;0.5mg/mL 标准
品:临用前标准品粉剂加入 0.5mL 蒸馏水和 6.5mL
的试剂二,震荡混匀充分,用水定容至 20mL 即为
0.5mg/mL 标准品应用液,4℃保存。0.05mg/mL 标准
品:取 0.5mg/mL 标准品应用液用蒸馏水 10 倍稀释
即为 0.05mg/mL 标准品应用液。
四、自备仪器或用品:
可见光分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、
1cm 光径比色皿、研钵、蒸馏水。
五、操作步骤:
1、样本前处理:
(1)、准确称取 0.1g 样本,加试剂一 1mL,8000 转/分机械
匀浆破碎 15 秒,间隔 30 秒,重复 3 次。80℃水浴提
取 20 分钟,4000 转/分离心 5 分钟,去上清留沉淀;
(2)、往沉淀中加入 0.5mL 蒸馏水,95℃糊化 15 分钟;
(3)、糊化后冷却静置,加入试剂二 0.35mL,95℃水浴 10
分钟。(每 5 分钟取出混匀 1 次);
(4)、完成后加入 0.85mL 蒸馏水,震荡混匀充分,4000 转
/分钟离心 10 分钟,取上清液即为样本上清液,待测。
(样本上清液一般需要稀释后才能进行下面操作,具
体稀释倍数需取个别样进行预试来确定,如土豆一般
用蒸馏水 50-100 倍稀释后进行下表操作)
V 提:样本前处理后总体积,1.7mL;
N 样本上清液稀释倍数;
W:样本鲜重,g。
七、注意事项:
1、匀浆完可用 1-2mL 80%的乙醇清洗匀浆机切头,清洗后
的清洗液并入该样本匀浆液中离心;
2、匀浆时尽量充分,否则会由于较大颗粒中的糖分无法分
离,进入样本上清从而使测定值升高;
3、操作时,试剂三应用液加入时尽量缓慢,否则易产生沸
腾现象使管中液体冲出,伤到人体;
4、操作可用 2mL 规格离心管,加完试剂盖上盖后 95℃反
应时不用扎孔;
5、比色前先混匀再比色;
6、标准曲线可以不做,只需按操作表进行单点定标(代入
计算公式计算)即可;
7、实验时务必戴好手套防止硫酸飞溅伤害人体;
8、干样取样可以少些,如取样 0.01g~0.02g,其余试剂加
入量不变。
植物淀粉含量测试盒
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文献和实验0 淀粉含量(mg) 0 40 80 120 160 200 2.
一、目的淀粉一般都是直链淀粉和支链淀粉的混合物。直链淀粉和支链淀粉含量和比例因植物种类而不同,决定着谷物种子的出饭率和食味品质,并影响着谷物的贮藏加工。通过本实验学习掌握双波长测定谷物中直链淀粉和支链淀粉的含量。二、原理根据双波长比色原理,如果溶液中某溶质在两个波长下均有吸收,则两个波长的吸收差值与溶质浓度成正比。直链淀粉与碘作用产生纯蓝色,支链淀粉与碘作用生成紫红色。如果用两种淀粉的标准溶液分别与碘反应,然后在同一个坐标系里进行扫描( 400 - 960 mm) 或做吸收曲线对含有直链
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