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- 2025年07月14日
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信帆生物
（Acetaldehyde dehydrogenase，ALDH 分光光度法）
一、测定原理：
在辅酶Ⅰ存在的条件下，乙醛脱氢酶催化乙醛和NAD+转化为乙酸和NADH，在340nm 处的吸光值会增加，测定340nm 处的吸光值变化，可计算得到乙醛脱氢酶的活性。
二、测定意义：
乙醛脱氢酶 (EC 1.2.1.10)是醛脱氢酶的一种，广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。主要作用是将乙醛氧化成乙酸，在酒精代谢中起主要作用。在人类和许多动物体内，线粒体乙醛脱氢酶能把对生物体有害的醇类转化，所以在细胞解毒研究中乙醛脱氢酶到高度关注；同时，乙醛脱氢酶在分子生物学以及相关疾病的检测方面有较广泛的研究应用。
三、自备仪器或用品：
紫外分光光度计、离心机、恒温水浴锅、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、蒸馏水、天平。
五、粗酶液提取:
1、培养细胞：按照细胞数量（10 4个）：提取液体积（mL）为 500～1000:1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细胞（冰浴，功率 300W，超声 3s、间隔 7s，超声 3min）；10000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为 1:5～10 的比例（建议取 0.1g 组织，加 1mL 提取液），进行冰浴匀浆；10000g 4℃离心 20min，取上清，置冰上待测。
3、液体样本:直接取样测定。
乙醛脱氢酶测试盒
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分析试剂盒安全、快速、稳定，可用于筛选蛋白激酶C抑制剂或激活剂、定性定量分析纯化或部分纯化的PKC激酶活性。 测试盒原理： 基于ELISA的基本原理。PKC底物被包被在酶标板上，在ATP存在的前提下，PKC激酶将底物磷酸化，洗掉游离的PKC激酶和其他成分。再加入特异性磷酸化抗体（只识别磷酸化底物，而与非磷酸化底物无交叉反应。）检测残留在酶标板上的磷酸化底物。通过酶标二抗放大信号，读出OD值（蛋白激酶活性与OD值的对数成正比）。与对照组相比，得出处理组的蛋白激酶活性
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