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12个月
- 英文名:
Recombinant Keratinocyte Differentiation Associated Protein (KRTDAP)
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100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
50ug/50ug
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥2180.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥3980.0 |
产品英文名称:Recombinant Keratinocyte Differentiation Associated Protein (KRTDAP)
别名:KDAP; UNQ467; KIPV467
种属:Homo sapiens (Human)
蛋白序列:Thr24~Gln99
标签:N-terminal His Tag
Uniprot:P60985
表达系统:Prokaryotic expression
来源:E.coli
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文献和实验的表达系统会造成质粒的不稳定,细胞生长速度的下降和重组蛋白产量的降低[32,33]。Lanzer和Bujard曾对常用的lac启动子-操纵子系统进行了广泛的研究,证明操纵子放在启动子序列的不同位置会造成70倍差异的抑制。将17bp的操纵子置于-10和-35六聚体区之间所形成的抑制比将其放在-35区的上游或-10区的下游要高50-70倍[34]。 启动子的第三个特性是其简便和廉价的可诱导性。大量生产蛋白质最常用的启动子是热诱导(λPL)和化学诱导(trp)启动子。异丙基硫代-β-D-半乳糖
,为E.coli中高效表达和纯化重组蛋白提供了极大方便。融合表达具有多方面的优点:如防止包涵体的形成,促进蛋白质的正确折叠,限制蛋白酶解和利于纯化[159,194]。 Uhlen和其同事[195]利用葡萄球菌A蛋白和合成的结构域(Z)开发了一种多功能的融合伴侣,除了能够作为纯化标记外,A蛋白组分还作为一种可溶性伴侣促进蛋白质的折叠,A蛋白信号肽的存在可使表达蛋白分泌到培养基中。另一个融合伴侣是链球菌G蛋白(SPG),它是一种细菌胞壁蛋白,在其氨基端具有分离的白蛋白结合区,在OH端具有免疫球蛋白
基因可以由组成型,诱导型或条件型启动子进行启动转录。在细胞分化和发育的研究中经常用到条件型启动子,它可以由某些特定因素引发,导致蛋白表达,影响细胞的分化。但是在重组蛋白的生产中,绝大多数表达载体使用强组成型的启动子。通常病毒来源的启动子,如SV40晚期启动子和CMV启动子,应用最为广泛。近年来,CHO来源的EF-1和GAPDH的启动子也被应用到蛋白生产中。 此外,密码子优化也可以提高基因的翻译水平。表达载体除了包含启动子、增强子和目的基因外,还需要有筛选标记基因或扩增标记基因,用于后续筛选。 二
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