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-20℃保存
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12个月
- 英文名:
Recombinant Acetyl Coenzyme A Acyltransferase 2 (ACAA2)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
50ug/50ug
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥2180.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥3980.0 |
产品英文名称:Recombinant Acetyl Coenzyme A Acyltransferase 2 (ACAA2)
别名:DSAEC; T1; Mitochondrial 3-Oxoacyl-Coenzyme A Thiolase; Beta-ketothiolase; Mitochondrial 3-oxoacyl-CoA thiolase
种属:Mus musculus (Mouse)
蛋白序列:Arg90~Ala397
标签:N-terminal His Tag
Uniprot:Q8BWT1
表达系统:Prokaryotic expression
来源:E.coli
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文献和实验重组蛋白的诱导 1. 接种含有重组氯霉素酰基转移酶蛋白的大肠杆菌BL21菌株于5mL LB液体培养基中(含100ug/mL 氨苄青霉素),37℃震荡培养过夜。 2. 转接1mL过夜培养物于100mL(含100ug/mL 氨苄青霉素)LB液体培养基中,37℃震荡培养至OD600 = 0.6 - 0.8。取10ul 样品用于SDS-PAGE 分析。 3. 加入IPTG至终浓度0.5 mmol/l, 37℃继续培养1-3h. 4. 12,000rpm 离心10 min, 弃上清,菌体
酶作用下连接入载体。4. 获得含重组表达质粒的表达菌种① 将连接产物转化大肠杆菌 DH5α,根据重组载体的标志(抗 Amp 或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。② 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确, 进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。③ 以此重组质粒 DNA 转化表达宿主菌的感受态细胞。5. 氯霉素酰基转移酶重组蛋白的诱导① 接种含有重组氯霉素酰基转移酶蛋白的大肠杆菌 BL21 菌株于 5 mL LB 液体培养基中(含 100
动物功物细胞.还必须加入遗传选择标记。常用的标记基因有胸腺激酶(tk)基因、二氢叶酸还原酶(dh]r)基因、新霉素(neo)抗性基因、氯霉素乙酰基转移酶(cat)基因等dhfr还可作为共扩增基因使外源基因的表达产物增加。当培养基中逐新增加氨甲蝶呤(MTX)的浓度时,随着细胞对MTX抗体的增加。dhfr基因与外源基因均明显扩增。据文献报道,在不断提高的选择压力下,dhfr及侧翼序列能扩增至上千个拷贝,大大增加目的基因的表达水平。 1.2 表达载体的结构元件 哺乳动物细胞表达载体的必要元件包括
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