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12个月
- 英文名:
Recombinant Growth Associated Protein 43 (GAP43)
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100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
50ug/50ug
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥2180.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥3980.0 |
产品英文名称:Recombinant Growth Associated Protein 43 (GAP43)
别名:F1; B-50; PP46; Neuron Growth-Associated Protein 43; Neuromodulin; Axonal Membrane Protein GAP-43; Protein F1; Calmodulin-Binding Protein P-57; Neural Phosphoprotein B-50
种属:Rattus norvegicus (Rat)
蛋白序列:Thr8~Ala226
标签:N-terminal His Tag
Uniprot:P07936
表达系统:Prokaryotic expression
来源:E.coli
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文献和实验牢记N端法则:当N端第二个残基是Leu、Arg、Lys、Phe、Tyr和Trp时,重组蛋白半衰期只有2分钟,而小侧链的氨基酸残基,如Ala,则可以提高蛋白稳定性。因此在设计载体时,要特别注意第二个密码子,避免上述残基的出现。处理高毒性蛋白:毒性极高的重组蛋白,其本底表达就会杀死原核宿主,质粒容易丢失,使其在大肠杆菌中很难得到高表达。采用可表达T7溶菌酶的宿主。T7溶菌酶是T7RNA聚合酶的抑制剂,采用含有T7溶菌酶质粒的宿主,如pLysS,可以降低重组蛋白在大肠杆菌快速生长期的本底
重组菌的生长温度,降低培养温度是减少包涵体形成的最常用的方法,较低的生长温度降低了无活性聚集体形成的速率和疏水相互作用,从而可减少包涵体的形成[4]。 2、 添加可促进重组蛋白质可溶性表达的生长添加剂,培养E.coli时添加高浓度的多醇类、蔗糖或非代谢糖可以阻止分泌到周质的蛋白质聚集反应,在最适浓度范围内添加这些添加剂不会影响细胞的生长、蛋白质的合成或运输,其它促重组蛋白质可溶性表达的生长添加剂还有乙醇(诱导热休克蛋白的表达)、低分子量的巯基或二硫化合物(影响细胞周质的还原态,从而影响
【求助】急问,在线等,装有大肠杆菌冻菌的离心管可以从-80拿出再用来离心吗?
动物肯定很多细胞死掉了.大肠也许坚强一些. 在4度下,是很难升温的,细胞经历了长时间的冰冻过程,必然死掉一些,有些时候,死掉的细胞会释放出来些蛋白酶,你可以加点抑制剂. 不过,最好按照操作步骤一步步来,别心急.增加了不确定性. woxingwosu 如果是用来提取重组蛋白,而且蛋白足够稳定时,应该影响不大的。反复冻融也是破细菌壁的一种方法。当然稳妥一点就像dnazyme版主所说的了。 sunm_1988
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