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- 详细信息
- 文献和实验
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-20℃保存
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Recombinant Oxysterol Binding Protein Like Protein 8 (OSBPL8)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
50ug/50ug
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥2180.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥3980.0 |
产品英文名称:Recombinant Oxysterol Binding Protein Like Protein 8 (OSBPL8)
别名:ORP8; OSBP10; Oxysterol-Binding Protein-Related Protein 8
种属:Homo sapiens (Human)
蛋白序列:Val148~Lys265
标签:N-terminal His Tag
Uniprot:Q9BZF1
表达系统:Prokaryotic expression
来源:E.coli
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文献和实验杆菌的包涵体可采用离心收获。 洗涤 包涵体常用的洗涤试剂为中性去垢剂和还原剂。包涵体中主要由重组蛋白组成,同时也含有一些外膜蛋白(Omp C、Omp F、Omp A)、16S 和 23S、5S的r RNA、质粒 DNA 和其它杂质。去除这些杂质,可采用去垢剂 Triton X-100、脱氧胆酸盐和低浓度的变性剂等对包涵体充分洗涤。包涵体洗涤的洁净程度,对于后续的纯化步骤十分重要,包涵体纯度高,可以大大降低后续的纯化压力。但是,变性剂尿素的使用应该注意的是大肠杆菌外膜蛋白Omp T(37 kD
的,但是这结果是不是假阳性呢?还得做个阴性对照。阴性对照如何设置呢?考虑到整个实验体系会出现 beads、抗X抗体、诱饵蛋白 X、靶蛋白 Y(co-IP): 可能出现的假阳性来源 需要的阴性对照 抗 X 抗体结合非特异的蛋白 与 IP 一抗种属亚型相同的免疫球蛋白(比如,抗 X 抗体是 Mouse IgG,阴性对照可使用 Mouse 免疫球蛋白) beads 对蛋白的非特异结合* 同上,此外还可进行 Pre clear,IP 正式实验前排除非特异结合蛋白。如果使用琼脂
印迹前常需要通过免疫沉淀,亚细胞分离等手段富集。 Western实验步骤 一、样品制备 对于Western Blotting实验而言,样品处理是关键步骤之一,获得的蛋白样品必须均质、可溶,并解离成单个多肽亚基,且尽量减少相互间的聚集,使其最终仅依赖本身的分子量大小进行分离。当目标蛋白的含量很低时,需要选取目标蛋白含量较高的组织或细胞器(如核抽提物),或者通过免疫沉淀等方式进行富集。通常样品有重组蛋白、细胞和组织等。 1. 样品收集 1)培养
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