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-20℃保存
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12个月
- 英文名:
Recombinant Caspase 6 (CASP6)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
50ug/50ug
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥2180.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥3980.0 |
产品英文名称:Recombinant Caspase 6 (CASP6)
别名:MCH2; Cysteinyl Aspartate Specific Proteinases 6; Caspase 6,Apoptosis-Related Cysteine Peptidase; Apoptotic protease Mch-2
种属:Bos taurus; Bovine (Cattle)
蛋白序列:Ala194~Lys293 (Accession # Q3T0P5)
标签:N-terminal His Tag
Uniprot:Q3T0P5
表达系统:Prokaryotic expression
来源:E.coli
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文献和实验问:请问各位高手,我想让酵母蛋白酶A失活,决定采用PCR进行DNA序列的突变,此法行的通吗?可有前人研究过? 答:国外有了"蛋白酶缺失"的用于重组蛋白表达的菌株。国内也许也有,小龙对于上游不大懂,不知道自己构建蛋白酶缺失的酵母菌是否有技术上的难度。参见一篇综述《生命的化学》2003 年23 卷1 期CHEMISTRY OF L IFE 2003,23(1) 酵母表达系统及其应用研究。 假如只是为了降低重组蛋白表达时被水解的可能,在提取液中加入蛋白酶抑制剂如PMSF可以部分解决。
成分。5.优化表达条件(1)重组蛋白不表达或者表达量低。如果重组蛋白不表达(包含体和可溶蛋白都没有)通过改变诱导剂浓度,诱导温度,时间等都不表达的时候,然后尝试更换菌株、质粒载体。降低诱导后培养温度。重组蛋白表达得越慢,其折叠效果就越好,大肠杆菌在4℃时依然可以表达重组蛋白,而将培养温度降低至25-30℃就能显著改善蛋白折叠。此方法不适用于温度诱导的重组蛋白表达;减少诱导剂。诱导剂浓度可以降低至1/10;选用Lac渗透酶缺陷型菌株,如Tuner、Rosetta等,也有很好的效果。这类菌株能够使进入每个细胞
蛋白、含二硫键蛋白在体外成功复性。 包涵体形成的原因 重组蛋白在宿主系统中高水平表达时,无论是原核表达体系或真核表达体系甚至高等真核表达体系,都会形成包涵体[2]。主要因为在重组蛋白的表达过程中,缺乏某些蛋白质折叠过程中需要的酶和辅助因子,或环境不适,无法形成正确的次级键等原因形成的[3]。 1、 表达量过高,研究发现在低表达时很少形成包涵体,表达量越高越容易形成包涵体。原因可能是合成速度太快,以至于没有足够的时间进行折叠,二硫键不能正确配对,过多的蛋白间的非特异
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