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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100⁺瓶
- 英文名:
proteinase K
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海睿安生物13611631389
- 保存条件:
2-8°C
- 规格:
100mg/瓶
Sigma-Millipore-Calbiochem货号539480-100mg蛋白酶K(别名:肽链内切酶)13611631389上海睿安生物
蛋白酶K来源于林伯氏白色念球菌
别名:肽链内切酶
说明
一般描述
丝氨酸蛋白酶,对多种变性和天然的高分子量蛋白质具有很强的蛋白水解活性。它可使内源性核酸酶迅速蛋白水解失活,因此可用于分离mRNA和高分子量DNA。优先裂解N-取代疏水性、脂肪族和芳香族氨基酸羰基旁的键。可被DFP、Hg2+和PMSF抑制。不会被金属螯合剂、巯基试剂、TLCK或TPCK灭活。
应用
在分离DNA和RNA的过程中,用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除内毒素结合的阳离子蛋白,如溶菌酶和核糖核酸酶A。
据报道,其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
用于测定酶在细胞膜上的定位
用于石蜡包埋组织切片的处理,暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。
生化/生理作用
蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族,具有活性位点催化三联体(Asp39-His69-Ser224)。它在一系列广泛的环境中均稳定:pH,缓冲盐,去污剂(SDS)以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下,蛋白酶K可保持活性,在不损害分离DNA完整性的前提下,可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。
警告
毒性:刺激性(B)
单位定义:一个mAnson单位定义为在37°C、pH 7.5条件下每分钟释放1.0µM Folin阳性氨基酸(以酪氨酸计)的酶的量。
外形:由乙酸钙冻干
重悬:复溶后,储存在冰箱中(4°C)。用50mM Tris-HCl、2 mM乙酸钙制备的pH 8.0的储备溶液在4°C下可稳定保存1年。
其他说明
Watazu, Y., et al. 1993.J. Lab. Clin. Anal.7, 81.
Lebherz, H.G., et al. 1986.生物化学。J.233, 51.
Ebeling, W., et al. 1974.Eur. J. Biochem.47, 91.
法律信息
CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

同行评审论文(部分文献)



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文献和实验Sigma-Millipore-Calbiochem货号539480-100mg蛋白酶K(别名:肽链内切酶)13611631389上海睿安生物
蛋白酶K来源于林伯氏白色念球菌
别名:肽链内切酶
说明
一般描述
丝氨酸蛋白酶,对多种变性和天然的高分子量蛋白质具有很强的蛋白水解活性。它可使内源性核酸酶迅速蛋白水解失活,因此可用于分离mRNA和高分子量DNA。优先裂解N-取代疏水性、脂肪族和芳香族氨基酸羰基旁的键。可被DFP、Hg2+和PMSF抑制。不会被金属螯合剂、巯基试剂、TLCK或TPCK灭活。
应用
在分离DNA和RNA的过程中,用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除内毒素结合的阳离子蛋白,如溶菌酶和核糖核酸酶A。
据报道,其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
用于测定酶在细胞膜上的定位
用于石蜡包埋组织切片的处理,暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。
生化/生理作用
蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族,具有活性位点催化三联体(Asp39-His69-Ser224)。它在一系列广泛的环境中均稳定:pH,缓冲盐,去污剂(SDS)以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下,蛋白酶K可保持活性,在不损害分离DNA完整性的前提下,可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。
警告
毒性:刺激性(B)
单位定义:一个mAnson单位定义为在37°C、pH 7.5条件下每分钟释放1.0µM Folin阳性氨基酸(以酪氨酸计)的酶的量。
外形:由乙酸钙冻干
重悬:复溶后,储存在冰箱中(4°C)。用50mM Tris-HCl、2 mM乙酸钙制备的pH 8.0的储备溶液在4°C下可稳定保存1年。
其他说明
Watazu, Y., et al. 1993.J. Lab. Clin. Anal.7, 81.
Lebherz, H.G., et al. 1986.生物化学。J.233, 51.
Ebeling, W., et al. 1974.Eur. J. Biochem.47, 91.
法律信息
CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

同行评审论文(部分文献)



/CIAA重复一次。取上层液加1/10体积5mol/L NaCl和2倍无水乙醇,�20℃过夜或�70℃2小时以上。4℃,10000rpm,离心10分钟,弃上清液。加80%乙醇不摇动,直接10000rpm离心,弃上清液,真空干燥。加适量(约200μl)TE溶解。测定含量后备用。 b) 重组质粒中目的基因的分离与纯化 先取少量纯化的重组质粒,用限制性内切酶切出目的基因,经电泳分离,确认。以200μl含2mg DNA(重组质粒)为例
的基本方法介绍如下: 1.所需溶液 (1)PBs 0.85% W/V NaCl,66mmol/L Na3 PO4 pH7.0 (2)含表面活性剂及蛋白酶K的PCR缓冲液 50mmol/L KCl, 10mmol/L Tris-HCl(pH8.3) 2.5mmol/L MgCl2 0.1mg/ml明胶,0.45%NP40,0.45%吐温20 高压灭菌,冷冻储存。临用前加0.6μl的10mg/ml蛋白酶K(水溶液)至100μl溶液中。 (3)溶血






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