效期内稳定,应避免反复冻融。
0.2 125I-T:红色液体,直接使用。含 1~3μCi 125I 标记的 19 位睾酮
衍生物,2~8℃保存,标识的有效期内稳定。
0.3 兔抗-T 抗体:蓝色液体,直接使用。2~8℃保存,标识的有效期
内稳定;开封后 42 天稳定。
0.4 驴抗兔免疫分离剂:液体,加样前充分摇匀。2~8℃保存标识的
有效期内稳定。开封后 45 天内稳定。
0.5 T 质控血清:淡黄色液体,直接使用。2~8℃保存 42 天内稳定,―
20℃冷冻保存标识的有效期内稳定,应避免反复冻融。
2 测定步骤
取圆底聚苯乙烯试管若干,用记号笔或特殊铅笔编号 NSB、S0-S5
和待测样品管等,然后用微量加样器按下表加样。加样前所有试剂(尤
其分离剂!)包括待测样品要摇匀,并且最好平衡到室温。
3 数据处理
3.1 联机处理: 由电脑自动处理得出结果。注意放射免疫方法和免疫
放射方法由于原理不同,处理软件也不一样,用户一定要使用适
合的处理软件进行数据处理。在此建议用户使用 log-logit 或四参
数数据处理模式。
3.2 手工作图或计算器处理:
3.2.1
百分结合率计算:设 S0管计数为 B0,各标准管或样品管计
数为 B,非特异管计数为 NSB,则百分结合率计算公式为 B/ B0=(B
-NSB)/( B0-NSB)×100%
3.2.2 logit 计算:各标准点或样品管的 logit 值计算公式为 logit=ln[(B/
B0)/(1-B/ B0)]
3.2.3 手工作图:以标准浓度取 log 值为横坐标,对应的 logit 值为纵
坐标在普通坐标纸上或以标准浓度为横坐标,对应的 B/B0 为纵
坐标在 log-logit 坐标纸上画出标准曲线(理想化时是一条直线)。
根据待测样品的 B/B0可以从坐标纸上查出样品的浓度值。注意:
如果使用普通坐标纸,查出的数值应取反对数才是最后的浓度
值。
3.2.4 计算器处理:使用有线性拟合功能的计算器,可以比较方便地
计算出样品浓度值,具体操作方法请查阅计算器的使用说明书。
3.3 尿液中睾酮的测定方法及数据处理
3.3.1 收集 24 小时尿,量总体积,混匀后取尿液 0.2ml,加 0.25N 盐
酸 0.8ml,于 30℃水浴水解 20~24 小时,以此水解尿作为测定样
品。
3.3.2 取水解尿样品 25μl,加到样品管中,用缓冲液(此缓冲液为睾
酮水解尿专用)补到 50ul 即加 25ul 测尿专用缓冲液。该缓冲液
为 0.24M Triss 溶液,其作用是将强酸性的水解尿样品调整为接
近中性,否则会使测定值严重失真(偏高)!,
3.3.3 24 小时睾酮尿含量的计算:
尿液浓度= A·V1/V2·50/V3 ng/ml=10A ng/ml
24 小时尿中睾酮总量=A·V1/V2·50/V3·Dng=0.01A·Dμg
其中: A—从标准曲线上查得睾酮的浓度(ng/ml)
V1——水解尿的总体积(1ml)
V2——被水解的尿体积(0.2ml)
V3——水解尿加入的体积(25μl)
50 为加入测量管中水解尿与缓冲液的总体积
D—24 小时总尿量(ml)
【产品性能指标】
1.测定范围:0.1~20ng/ml;
2.灵敏度:0.02ng/ml;
3.精密度:批内变异 CV<10%;批间变异 CV<15%。
4.特异性:19 位睾酮抗体与下列睾酮类似物的交叉反应率如下:
双氢睾酮
1.1×10 -2%
雌二醇
2.1×10 -2%
雌 三 醇
2×10 -15%
孕 酮
3.2×10 -2%
雄烯二酮
1.2×10 -5%
5.使用期限:见产品外包装。
【注意事项】
1.收到试剂盒后,尽快存放在 2~8℃。
2.使用前请详细阅读此说明书。
3.当样品中睾酮浓度高于 20ng/ml 时,可将样品用“0”标准或较低
含量的女性血清稀释 5~10 倍后复测,测定浓度乘以稀释倍数即
为样品浓度。
5.吸弃上清液时,注意不得损失沉淀物,否则将明显影响测定结果。
6.请在有效期内使用。
8.使用本盒应注意放射防护,放射性废弃物须按放射防护条例规定处理。
9.使用本品的操作人员应经过专业技术培训。
【贮藏】2~8℃保存。
【有效期】1 个月。
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