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信帆生物
生长素GHRELIN放免检测服务
生长素GHRELIN放免试剂盒
GHRELIN是一种含28个氨基酸残基的脑肠肽,主要由胃黏膜的内分泌细胞分泌,是生长激素促分泌素受体(GHS-R)的一种内源性配体,1999年由日本国立循环器病中心Kojima等[1]人从小鼠和人的胃组织中成功分离并鉴定.Ghrelin系由28个氨基酸构成的多肽,能够和GHS-R结合而刺激生长激素GH的分泌.就目前的研究报道来看,Ghrelin除调节生长激素分泌外,还在能量平衡、胃功能、心血管系统以及肿瘤生长等诸多方面表现出重要的生物学效应.
标本采集:采血前试管内加放抑肽酶30ul/5ml(含150 IU以上)和10%EDTA.Na2 30uL,采血后立即置冰中,30分钟内4℃下2000转/分,离心15分钟取血浆置-20℃待测,可保存3-6个月。
组成:
1、GHRELIN抗体一瓶。 2、125I-GHRELIN 标记一瓶。
3、缓冲液一瓶。 4、分离剂(第二抗体)一瓶。
5、GHRELIN标准品1瓶,倍比稀释浓度为:10、 20、40、80、 160、320、640、1280ng/ml
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果.
附:血浆标本过柱步骤:
1、取0.5ml血浆和0.5ml含1%的TFA(缓冲液A ),在4℃下3500转/分 离心20分钟,取上清。
2、在含60%乙晴溶液中加1%TFA,即为缓冲液B,将缓冲液B 3ml对Sep-Pak C18 柱进行平衡,接着用缓冲液A 3ml 冲洗。
3、将1处理的上清血浆缓慢注入Sep-Pak C18柱中。
4、用缓冲液A 5ml 以1ml/2分钟速度淋洗Sep-Pak C18 柱。
5、再用缓冲液B 3ml淋洗Sep-Pak C18,速度为1ml/3分钟,并收集上述淋洗液。
6、将上述淋洗液全部分别装入10ml西林瓶中,-42℃ 冷冻干燥 ,备用。
7、取干燥后的西林瓶用500 ul 0.05M PH 7.4 PB 进行溶解,并在振荡器上振荡3分钟。实验
时取200ul进行加样。操作步骤见说明书。
Sep-Pak C-18: Waters.inc. Massachusetts.USA TFA:SIGMA .CO .USA 不提供上述二种
试剂(或材料)。
正常参考值:55.25-95.140ng/ml 78.25±11.29ng/ml
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GHRELIN是一种含28个氨基酸残基的脑肠肽,主要由胃黏膜的内分泌细胞分泌,是生长激素促分泌素受体(GHS-R)的一种内源性配体,1999年由日本国立循环器病中心Kojima等[1]人从小鼠和人的胃组织中成功分离并鉴定.Ghrelin系由28个氨基酸构成的多肽,能够和GHS-R结合而刺激生长激素GH的分泌.就目前的研究报道来看,Ghrelin除调节生长激素分泌外,还在能量平衡、胃功能、心血管系统以及肿瘤生长等诸多方面表现出重要的生物学效应.
标本采集:采血前试管内加放抑肽酶30ul/5ml(含150 IU以上)和10%EDTA.Na2 30uL,采血后立即置冰中,30分钟内4℃下2000转/分,离心15分钟取血浆置-20℃待测,可保存3-6个月。
组成:
1、GHRELIN抗体一瓶。 2、125I-GHRELIN 标记一瓶。
3、缓冲液一瓶。 4、分离剂(第二抗体)一瓶。
5、GHRELIN标准品1瓶,倍比稀释浓度为:10、 20、40、80、 160、320、640、1280ng/ml
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果.
附:血浆标本过柱步骤:
1、取0.5ml血浆和0.5ml含1%的TFA(缓冲液A ),在4℃下3500转/分 离心20分钟,取上清。
2、在含60%乙晴溶液中加1%TFA,即为缓冲液B,将缓冲液B 3ml对Sep-Pak C18 柱进行平衡,接着用缓冲液A 3ml 冲洗。
3、将1处理的上清血浆缓慢注入Sep-Pak C18柱中。
4、用缓冲液A 5ml 以1ml/2分钟速度淋洗Sep-Pak C18 柱。
5、再用缓冲液B 3ml淋洗Sep-Pak C18,速度为1ml/3分钟,并收集上述淋洗液。
6、将上述淋洗液全部分别装入10ml西林瓶中,-42℃ 冷冻干燥 ,备用。
7、取干燥后的西林瓶用500 ul 0.05M PH 7.4 PB 进行溶解,并在振荡器上振荡3分钟。实验
时取200ul进行加样。操作步骤见说明书。
Sep-Pak C-18: Waters.inc. Massachusetts.USA TFA:SIGMA .CO .USA 不提供上述二种
试剂(或材料)。
正常参考值:55.25-95.140ng/ml 78.25±11.29ng/ml
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技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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