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见瓶身
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见瓶身
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999
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麦格生物
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71-30-7
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1瓶
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文献和实验病毒学顶刊 J VIROL:详述流感病毒重要氨基酸位点 Y82 的作用,进一步了解病毒复制机理
病毒,表明 Y82 点具有结构可塑性及较宽的突变范围替代性。图片来源:文章截图值得一提的是,Y82C 与 WT 相比,对于利巴韦林和氮杂胞嘧啶核苷这两种 RNA 诱变剂的作用更为敏感,符合变异株的生理特点。且 Y82C 突变率高,这对病毒增殖产生不良影响。总体而言,这篇文章胜在立意新颖、工作量庞大,符合权威病毒学杂志的录稿要求。在后续研究中,研究者可关注类似于 K359 的经典关键位点。利用反向遗传学技术拯救重组病毒,传代多次后检测全序列出现的突变位点,探究该突变位点在病毒结构、功能中发挥的作用,是否
DNA 样品,将未甲基化的胞嘧啶(C)转化为尿嘧啶(U)。重亚硫酸盐处理不会影响甲基化的胞嘧啶(m5C) 。为了检测甲基化位点,一对引物经设计带有鸟嘌呤(G),可与目标序列中的 m5C 配对;为了检测未甲基化位点,另一对引物带有腺嘌呤(A),可与重亚硫酸盐转化分子中的U配对(随后,与后续 PCR 循环中的胸腺嘧啶(T)配对)。通过引物配对得到的阳性 PCR 扩增结果可用于确定位点的甲基化状态(图 7)。 图 7.甲基化特异性 PCR 第一步,使用重亚硫酸盐处理 DNA 样品,将未甲基化的胞嘧啶转化
) 。 ( 2 ) 提取介质:被收集的植物材料置于提取介质中。提取介质是为稳定亚细胞馏分的混合试剂。依照 Greimer 和 Deltoid [13」所述并稍作改动:2% 阿拉伯树胶(Sigma) 、1.25% Ficoll (Sigma) 、2.5% 硫酸葡萄聚糖(Fluka) 、25 mmol/L Tris-HCl ( pH 7.4)、0.5 mmol/L EDTA、2.5 mmol/L MgCl2、4 mmol/L 正辛醇、8 mmol/L β- 疏基乙醇 ( Sigma) 、6.8 mmol/L 二乙基焦
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