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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
北京百奥创新科技有限公司
- 库存:
大量
- 样本:
血清,血浆或其他生物体液
- 应用:
体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中OT浓度。
- 检测方法:
Colormetric
- 检测范围:
15.63~1000 pg/mL
- 规格:
48T;96T;96T*5
用途:该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中OT浓度。
检测原理
本试剂盒采用竞争ELISA法。用OT抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的OT与包被的OT竞争生物素标记的抗OT单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,OT浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中OT的浓度。
| 反应类型 | 竞争法 |
| 规格 | 96T |
| 反应时间 | 2.0h |
| 反应性 | 通用 |
| 检测方法 | Colormetric |
| 检测范围 | 15.63-1000 pg/mL |
| 灵敏度 | 9.38 pg/mL |
| 样本体积 | 50μL |
| 样本类型 | 血清、血浆或其他相关生物液体 |
特异性:可检测样本中的OT,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
重复性:板内,板间变异系数均<10%。
典型数据
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | O.D | Average |
|---|---|---|
| 1000 | 0.342 0.348 |
0.345 |
| 500 | 0.43 0.446 |
0.438 |
| 250 | 0.625 0.597 |
0.611 |
| 125 | 0.885 0.923 |
0.904 |
| 62.5 | 1.325 1.307 |
1.316 |
| 31.25 | 1.784 1.762 |
1.773 |
| 15.63 | 2.152 2.168 |
2.16 |
| 0 | 2.72 2.73 |
2.725 |
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精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean (pg/mL) |
53.20 | 153.88 | 495.39 | 56.27 | 139.06 | 544.58 |
| Standard deviation |
2.78 | 7.02 | 16.10 | 2.97 | 6.04 | 23.85 |
| C V (%) | 5.23 | 4.56 | 3.25 | 5.28 | 4.34 | 4.38 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 92-103 | 98 |
| EDTA plasma (n=8) | 92-104 | 99 |
| Cell culture media (n=8) | 88-102 | 94 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 87-97 | 94-110 | 93-107 |
| Average (%) | 92 | 101 | 100 | |
| 1:4 | Range (%) | 88-100 | 91-108 | 94-108 |
| Average (%) | 94 | 99 | 101 | |
| 1:8 | Range (%) | 80-92 | 92-106 | 98-112 |
| Average (%) | 87 | 97 | 103 | |
| 1:16 | Range (%) | 90-103 | 97-110 | 96-108 |
| Average (%) | 95 | 102 | 101 |
试剂盒组成及保存
未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
| 中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
|---|---|---|---|
| ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 条 | -20℃,可存放6个月 |
| 冻干标准品 | Reference Standard | 2支 | |
| 浓缩生物素化抗体(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
| 浓缩HRP酶结合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光),可存放6个月 |
| 标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6个月 |
| 生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
| 底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
| 反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
| 封板覆膜 | Plate Sealer | 5 张 | |
| 产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
| 质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
试验所需自备物品
- 1.酶标仪(450nm波长滤光片)
- 2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
- 3.37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
- 4.吸水纸
操作步骤
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1. 对应板孔中加入50μL标准品工作液或样本后,立即每孔加入50μL生物素化抗体工作液,37℃孵育45分钟 |
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2. 弃掉板内液体,洗板3次 |
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3. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次 |
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4. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟左右 |
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5. 每孔加入50μL终止液 |
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6. 立即在450nm波长下读数,处理数据 |
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文献和实验佚名 下丘脑和垂体在解剖与功能上有密切关系。下丘脑与神经垂体实际为一个解剖、功能单位。下丘脑的视上核和室旁核神经细胞的轴突,经漏斗进入神经垂体的神经部(即垂体后叶),该神经细胞合成加压素(即抗利尿激素antidiuretic hormone,ADH)及催产素(oxytocin,OT),其分泌颗粒沿轴突运送到神经部,然后释放。下丘脑结节漏斗核等处的神经细胞,合成
,而把载体与半抗原联接在一起。在免疫原的制备中,应根据不同的半抗原选用偶联剂。 (三)制备过程 生物秀模式生物与实验动物论坛 http://bbs.bbioo.com/forum-150-1.html 以制备催产素(OT)免疫原为例: (1)1mgOT,溶解于1mL双 蒸馏 水或0.25%醋酸溶液中。10mgTG溶解于1mL 0.1mol/LPBS(pH7.5)或 蒸馏 水内。 (2)把OT溶液与TG溶液
和室旁核神经细胞的轴突,经漏斗进入神经垂体的神经部(即垂体后叶),该神经细胞合成加压素(即抗利尿激素antidiuretic hormone,ADH)及催产素(oxytocin,OT),其分泌颗粒沿轴突运送到神经部,然后释放。下丘脑结节漏斗核等处的神经细胞,合成多种释放激素及抑制激素,其分泌颗粒在漏斗处释放入血,调节腺垂体功能。腺垂体包括远侧部(即垂体前叶)、中间部及结节部。垂体前叶在HE染色切片中可见三种细胞:嗜酸性细胞、嗜碱性细胞及嫌色细胞。电镜下,在细胞的胞浆中均可见有或多或少,不同大小的分泌
















