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- 详细信息
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-80℃
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90天
- 英文名:
pCMV-SPORT6-Atp5sl(mouse)(缺16bp)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pCMV-SPORT6-Atp5sl(mouse)(缺16bp)
货号:KM1054139
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:基因模板
片段类型:cDNA
片段物种:小鼠
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验1、分别设立两个反应,用适当的限制性内切核酸酶消化1-10μg质粒DNA和外源DNA片段,使它们能产生平末端。2、苯酚:氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外源DNA片段。3、分别用TE(pH 8.0)重新溶解纯化出的两种DNA沉淀,使终浓度为100 ng/ml。假设1 bp相当于660Da,计算DNA的终浓度(pmol/ml)。4、将载体DNA去磷酸化。5、按下表将适量的DNA转移至无菌的0.5ml离心管:管号DNAA和E载体1 [60fmol (~100ng)]B外源插入
1.分别设立两个反应,用适当的限制性内切核酸酶消化1~10μg质粒DNA和外源DNA片段,使它们能产生平末端。2.苯酚:氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外源DNA片段。3.分别用TE(pH 8.0)重新溶解纯化出的两种DNA沉淀,使终浓度为100 ng/ml。 假设1 bp相当于660 Da,计算DNA的终浓度(pmol/ml)。4.将载体DNA去磷酸化。5.按下表将适量的DNA转移至无菌的0.5 ml离心管: 管号DNAA和E载体
限制性酶切位点。3. ShRNA 插入片段中的茎环应当靠近寡核苷酸的中央。4. 5~6 个 T 必须放置在 ShRNA 插入片段尾部以确保 RNA 聚合酶 III 终止转录。5. 在正义链和反义链序列上不能出现连续 3 个或以上的 T。这可能导致 ShRNA 转录的提前终止。下面以 pSUPER 质粒载体设计 ShRNA 为例:1. 选择双酶切位点分别是 BglII-HindIII site。2. pSUPER ShRNA design model:红色部分包含限制性酶切位点,绿色部分为茎环序列。3. shRNA 的引物
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