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90天
- 英文名:
pExpress-1-Dner(rat)(1点突变缺失1-1172bp)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pExpress-1-Dner(rat)(1点突变缺失1-1172bp)
货号:KM1054393
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:基因模板
片段类型:cDNA
片段物种:大鼠
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验PCR 将模板扩增出来, 待突变的质粒通常来源于大肠杆菌等细菌,在细菌中会被甲基化修饰,而在体外通过 PCR 扩增得到的质粒不会被甲基化。这样用甲基化酶 DpnI 酶处理,可以消化掉待突变的质粒模板,而使通过 PCR 扩增出来的含有突变位点的质粒被选择性地保留下来。1.突变引物设计: 向质粒进行单点或者多点突变,只需要设计一对引物,进行 PCR 的扩增,替换掉野生型基因的突变位点碱基。(1) 通常突变引物长度为 25~45bp, 一般都是以要突变的碱基为中心, 各加上两边的一段序列, 两边长度至少
PCR 将模板扩增出来, 待突变的质粒通常来源于大肠杆菌等细菌,在细菌中会被甲基化修饰,而在体外通过 PCR 扩增得到的质粒不会被甲基化。这样用甲基化酶 DpnI 酶处理,可以消化掉待突变的质粒模板,而使通过 PCR 扩增出来的含有突变位点的质粒被选择性地保留下来。1.突变引物设计: 向质粒进行单点或者多点突变,只需要设计一对引物,进行 PCR 的扩增,替换掉野生型基因的突变位点碱基。(1) 通常突变引物长度为 25~45bp, 一般都是以要突变的碱基为中心, 各加上两边的一段序列, 两边长度至少
实用 DNA 突变技术 (一)PCR法扩增启动子5’端系列缺失突变体 采用PCR 方法从基因组中扩增目的基因的全长启动子,在所扩增的片段两端分别引入限制性内切酶位点,以用于构建pGL3 basic报告基因表达质粒载体。同样采用PCR方法,以目的基因全长启动子报告基因表达质粒为模板分别扩增目的基因启动子5’端系列缺失突变体,这样就可以构建5’端系列缺失目的基因的缺失突变体。 连续PCR引入突变位 (二
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