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-80℃
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90天
- 英文名:
pExpress-1-Cyren(rat)(1点突变缺失70bp)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pExpress-1-Cyren(rat)(1点突变缺失70bp)
货号:KM1042809
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:基因模板
片段类型:cDNA
片段物种:大鼠
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验实用 DNA 突变技术 (一)PCR法扩增启动子5’端系列缺失突变体 采用PCR 方法从基因组中扩增目的基因的全长启动子,在所扩增的片段两端分别引入限制性内切酶位点,以用于构建pGL3 basic报告基因表达质粒载体。同样采用PCR方法,以目的基因全长启动子报告基因表达质粒为模板分别扩增目的基因启动子5’端系列缺失突变体,这样就可以构建5’端系列缺失目的基因的缺失突变体。 连续PCR引入突变位 (二
,可以通过合适的方法转染宿主细胞以回收具有感染性的病毒粒子,大体上有两种途径可达此目的。 3. 1 将全长cDNA 克隆到含有强启动子的质粒载体上,在体外用RNA 聚合酶转录系统进行体外转录得到感染性转录本(RNA) ,再用转录产物感染宿主 细胞,回收感染性病毒粒子。这种方法中启动子的选择是很重要的,因为它将影响到体外转录本的产量和完整性。人们经常使用的启动子有: T7 , T3 ,Sp6 等强的启动子。在使用启动子的策略上,既可以把全长cDNA 序列克隆到含有这些启动子的载体中,又可以在合成
较多、周期较长,不能用于点突变、小的缺失或插入、转录末端片段及缺乏合适酶切位点的基因检测,因为往往不清楚什么情况下某一器官或组织会发生基因重组,也不知道组织中基因嵌合的程度,故可能难以达到预期目的。另外,酶切结果也可使cDNA 的信息量丢失。 2.4错配扫描(genomic mismatch scanning, GMS)法 GMS采用与RDA相反的思路[17],目的是从遗传背景有差异,但遗传性状相同的远亲受累亲属中筛选出那些可能包含有导致这一性状的基因相同的DNA 片段(IBD序列)。GMS
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