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- 保存条件:
-80℃
- 保质期:
90天
- 英文名:
pCR4-TOPO-PWWP2A(1点突变 2点缺失)(human)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pCR4-TOPO-PWWP2A(1点突变 2点缺失)(human)
货号:KM1034816
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:基因模板
片段类型:cDNA
片段物种:人
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验通过加入基因组 DNA 模板以及设计好的引物进行目的基因的扩增,得到 PCR 产物后进行琼脂糖凝胶电泳验证条带大小,然后通过胶回收,获得纯化目的片段产物。由于加入保护碱基,回收产物需要进行限制性内切酶切从而暴露黏性末端。2. 线性化质粒:将原始的质粒载体,比如 pcDNA3.1 质粒,选择合适的酶切位点,比如 NheI/KpnI 进行酶切,获得线性化的质粒。酶切体系一般选择 50ul,试剂加好之后 37°C 孵育 6~8 小时,或适当延长时间,保证质粒酶切完全。每隔一段时间振荡一下并离心以防液滴蒸发
通过加入基因组 DNA 模板以及设计好的引物进行目的基因的扩增,得到 PCR 产物后进行琼脂糖凝胶电泳验证条带大小,然后通过胶回收,获得纯化目的片段产物。由于加入保护碱基,回收产物需要进行限制性内切酶切从而暴露黏性末端。2. 线性化质粒:将原始的质粒载体,比如 pcDNA3.1 质粒,选择合适的酶切位点,比如 NheI/KpnI 进行酶切,获得线性化的质粒。酶切体系一般选择 50ul,试剂加好之后 37°C 孵育 6~8 小时,或适当延长时间,保证质粒酶切完全。每隔一段时间振荡一下并离心以防液滴蒸发
146个氨基酸的编码信息。JM109宿主菌染色体上带有Lac Z的C端部分编码信息,它们编码的肽段各自都不具有酶活性, 但它们在同一细胞内可以通过非共价键结合起来, 形成具有β-半乳糖苷酶活性的蛋白质。质粒载体与Lac Z基因上缺失近操纵基因区段的β-半乳糖苷酶阴性的大肠杆菌突变体之间的这种互补作用称为α互补。 1实验目的: 掌握CaCl2法将载体(质粒)转化入受体(大肠杆菌)的实验技术 2 实验步骤: 2.1 配选择
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