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90天
- 英文名:
pCR4-TOPO-MOS(mouse)
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100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pCR4-TOPO-MOS(mouse)
货号:KM1034677
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:基因模板
片段类型:cDNA
片段物种:小鼠
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验【精华】vol 687 Chapter 3 采用Splinkerette-PCR技术对前病毒基因组插入位点进行分离
7.5), 1 mMEDTA, and 2 M NaCl. 11. 0.1 N NaOH. Other reagents required are the same as listed in Subheading 2.2. 2.4. PCR Product Cloning and Sequencing 1. In-gel DNA purification kit (Qiagen) (see Note 3). 2. TOPO-TA cloning vector
限制性酶切位点。3. ShRNA 插入片段中的茎环应当靠近寡核苷酸的中央。4. 5~6 个 T 必须放置在 ShRNA 插入片段尾部以确保 RNA 聚合酶 III 终止转录。5. 在正义链和反义链序列上不能出现连续 3 个或以上的 T。这可能导致 ShRNA 转录的提前终止。下面以 pSUPER 质粒载体设计 ShRNA 为例:1. 选择双酶切位点分别是 BglII-HindIII site。2. pSUPER ShRNA design model:红色部分包含限制性酶切位点,绿色部分为茎环序列。3. shRNA 的引物
the same primers that i designed for the initial PCR reaction? Which vector should i use? Do you have any to recommend?You can do a direct sequencing using both primers used for PCR. If you do want to clone it, just do a TA cloning. I recommend Invitrogen's Topo TA
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