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-80℃
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90天
- 英文名:
pBlueScriptR-ZBTB21(human)(1点突变)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pBlueScriptR-ZBTB21(human)(1点突变)
货号:KM1032109
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:基因模板
片段类型:cDNA
片段物种:人
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验基因的体外定点突变是常用的分子实验技术,主要用于研究蛋白质结构与功能关系或者验证 microRNA 与靶基因是否结合。今天为大家介绍下基因突变质粒的构建原理与方法。第一阶段:野生型质粒构建1. 引物设计:根据需要验证的基因序列,设计需要扩增的基因片段引物。引物设计方法如下:(1)引物 F:5’ 端 - 保护碱基序列 + 限制性内切酶 1 酶切位点序列 + 基因正向引物序列 - 3’端(2)引物 R:5’ 端 - 保护碱基序列 + 限制性内切酶 2 酶切位点序列 + 基因反向引物序列 - 3’端
基因的体外定点突变是常用的分子实验技术,主要用于研究蛋白质结构与功能关系或者验证 microRNA 与靶基因是否结合。今天为大家介绍下基因突变质粒的构建原理与方法。第一阶段:野生型质粒构建1. 引物设计:根据需要验证的基因序列,设计需要扩增的基因片段引物。引物设计方法如下:(1)引物 F:5’ 端 - 保护碱基序列 + 限制性内切酶 1 酶切位点序列 + 基因正向引物序列 - 3’端(2)引物 R:5’ 端 - 保护碱基序列 + 限制性内切酶 2 酶切位点序列 + 基因反向引物序列 - 3’端
质粒线性化;(5)将线性化的质粒电转化至枯草杆菌;筛选重组子..通过上述6个步骤是否能通过同源重组完成枯草杆菌突变株的构建?(园友qzh21sohu)A:(1)自杀质粒构建好后,不必线性化,可直接转入受体菌。(2)按这6个步骤可以得到阳性克隆,但是你无法筛选,因为我没有在你的步骤中发现筛选标记(如抗生素抗性),一般这个筛选标记是在要突变的基因中间的。不过如果你不是基因失活,而只是点突变,那就不能将筛选标记放在突变基因中间,而应该与它紧邻,在突变基因和筛选标记两端加上相应的同源序列(1kb左右)。不过这样还有一个问题
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