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-80℃
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90天
- 英文名:
pOTB7-TMEM243
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pOTB7-TMEM243
货号:KM1028210
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:基因模板
片段类型:cDNA
片段物种:人
原核抗性:Chl
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验比由正义链和反义链在细胞内退火后合成的dsRNA 似乎更能有效地抑制靶基因的表达。Brummelkamp[16 ]等构建了pSU2PER 质粒载体,应用了聚合酶ⅢH12RNA 基因启动子起始RNA 的合成。通过模板设计,使体内合成的siRNA 呈发夹样结构,并且能修饰3’端形成两个尿苷酸的突出结构,与化学合成的siRNA 结构相类似。为了使RNAi 技术成为可以控制的诱导基因沉默的方法,Miyagishi 等还建立了四环素调节的U6 启动子系统,通过控制U6 启动子就可以指令RNAi 在特定的时间发生
,可以通过合适的方法转染宿主细胞以回收具有感染性的病毒粒子,大体上有两种途径可达此目的。 3. 1 将全长cDNA 克隆到含有强启动子的质粒载体上,在体外用RNA 聚合酶转录系统进行体外转录得到感染性转录本(RNA) ,再用转录产物感染宿主 细胞,回收感染性病毒粒子。这种方法中启动子的选择是很重要的,因为它将影响到体外转录本的产量和完整性。人们经常使用的启动子有: T7 , T3 ,Sp6 等强的启动子。在使用启动子的策略上,既可以把全长cDNA 序列克隆到含有这些启动子的载体中,又可以在合成
步骤主要应是以下几方面:(1) 把已分离得到的转座子与选择标记构建成含转座子的质粒载体。(2) 把转座子导入目标植物。(3) 利用Southern杂交等技术检测转座子是否从载体质粒中转座到目标植物基因组中,这是转座子定位和分离目标基因所不可缺少的。(4) 转座子插入突变的鉴定及其分离(Ellis等,1992)。通常用于克隆植物基因的转座子有玉米的Ac. Mu, Smp和Ds等。Ac含有编码转座酶的基因,能够自主的转座,Ds不含转座酶所以不能自主的转座,但Ds-Ac系统因Ac为Ds提供了转座酶就可以自主
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