- ￥680 - 1280
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM1028178
- 2026年09月25日
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90天
- 英文名：
pCDNA3.1-EGFP-3×Linker-M(HCoV-229E)
- 库存：
100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
0.5ug/0.5ug
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥1280.0 |
英文名称：pCDNA3.1-EGFP-3×Linker-M(HCoV-229E)
货号：KM1028178
图谱：微客服
宿主：哺乳细胞
用途：蛋白表达
片段类型：ORF
片段物种：新冠病毒
原核抗性：Amp
真核抗性：Neo/G418
荧光标记：绿色
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文献和实验-MEM、DMEM培养基和M-MLV逆转录酶；小牛血清；G418；DIG High PrimeDNA Labeling and Detection Starter Kit I1。 质粒 pGL3-promoter；含EBVR的质粒p220.2。 重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR的构建 采用StuI和XbaI消化p220.2，获得长4.7 kb的EBVR，包括EBV核抗原1(EBNA1)和OriP，克隆至pGL3-promotor的SV40启动子下游Hind Ill
以提高转化效率。特殊情况下，外源DNA分子的末端与所用的载体末端无法相互匹配,则可以在线状质粒载体末端或外源DNA片段末端接上合适的接头(linker)或衔接头(adapter)使其匹配, 也可以有控制的使用E. coli DNA聚合酶Ⅰ的klenow大片段部分填平3'凹端,使不相匹配的末端转变为互补末端或转为平末端后再进行连接。 本实验所使用的载体质粒DNA为pBS,转化受体菌为E. coli DH5α菌株。由于pBS上带有Ampr 和lacZ基因,故重组子的筛选采用Amp抗性筛选与α-互补现象
简便易行。该系统试剂包括： 20μg 特异性引物 200μl M-MLV第一链缓冲液(5×)，配方如下: 250mmol/L Tris·Cl pH8.3(37℃时); 375mmol/l KCl; 15mmol/L MgCl2; 50mmol/L DTT; 10mmol/L dATP, dCTP, dGTP, dTTP混合物(各2.5mmol/L) 2×625μ rRNasinR RNA酶抑制剂 10,000μ M-MLV反转录酶, RNase H- 5μg
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