- ￥680 - 1280
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM1027222
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃
- 保质期：
90天
- 英文名：
pOTB7-MON1A(前端60bp不一样)
- 库存：
100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
0.5ug/0.5ug
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥1280.0 |
英文名称：pOTB7-MON1A(前端60bp不一样)
货号：KM1027222
图谱：微客服
宿主：大肠杆菌
用途：基因模板
片段类型：cDNA
片段物种：人
原核抗性：Chl
真核抗性：
荧光标记：
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文献和实验1、分别设立两个反应，用适当的限制性内切核酸酶消化1－10μg质粒DNA和外源DNA片段，使它们能产生平末端。2、苯酚：氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外源DNA片段。3、分别用TE（pH 8.0）重新溶解纯化出的两种DNA沉淀，使终浓度为100 ng/ml。假设1 bp相当于660Da，计算DNA的终浓度（pmol/ml）。4、将载体DNA去磷酸化。5、按下表将适量的DNA转移至无菌的0.5ml离心管：管号DNAA和E载体1 [60fmol (~100ng)]B外源插入
1 [60fmol (~100ng)]B外源插入片段2[60fmol (~10ng)]C和F载体1（60fmol）和外源插入片段3（60fmol）D线状载体（5’-磷酸化）（60fmol）G环状载体[60fmol (~10ng)]1 载体DNA已进行去磷酸化2 外源目的DNA可以连接接头。3 连接反应中，质粒载体和插入的DNA片段摩尔比一般为1：1。DNA的总浓度应约为10ng/μl。 a. A、B和C管中加入： 10×连接缓冲液 1.0μl T4噬菌体连接酶
(Klenow酶补平)和XbaI之间，构建重组质粒载体pGL3-EBVR。pGL3-EBVR经Bgl I1和BamH I双酶切得到SV40启动子和EBVR片段，插入pcDNA3-EGFP中CMV启动子上游BglI1位点处，构建重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR。 重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBNA1-MAR的构建 采用Hindin和EcoRI消化pCL，获得800 bp的人13-IFN基因上游IFN-MAR，将此片段克隆至pBluescript中，构建重组质粒载体pBlue
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