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90天
- 英文名:
pOTB7-TP53TG1
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100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pOTB7-TP53TG1
货号:KM1026788
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:基因模板
片段类型:ncRNA
片段物种:人
原核抗性:Chl
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验(一)细菌培养物的生长 从琼脂平板上挑取一个单菌落,接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长),然后从中纯化质粒,质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载体(如pUC系列)都能复制到很高的拷贝数,惟致只要将培养物放在标准LB 培养基中生长到对数晚期,就可以大量提纯质粒。此时,不必造反性地扩增质粒DNA。然而,较长一代的载体(如pBR322)由于不能如此自由地复制,所以需要在得到部分生长的细菌培养物中加入氯霉素继续培养若干小时,以便对质粒进行性扩增。氯
Northern杂交试验指导手册-为制备RNA探针模板的DNA片断亚克隆
质粒 ( 50μg/μl) 6μl 目的DNA ( 100μg/μl) 2μl 10X 连接缓冲液 2μl DNA 连接酶 6μl 无菌蒸馏水 2. 反应管置于15℃条件下保温反应24小时,65℃加热10min.终止反应。 3.取5~10μl连接反应物用微型凝胶电泳检测连接效果,其余反应物于-20℃保存备用。 注意事项 1.保证连接反应中目的DNA与质粒载体的浓度比例在3∶1,因为高浓度的DNA有利于片断与载体的连接,低浓度的DNA则会增加
15℃条件下保温反应24小时,65℃加热10min.终止反应。 3.取5~10μl连接反应物用微型凝胶电泳检测连接效果,其余反应物于-20℃保存备用。 注意事项 1.保证连接反应中目的DNA与质粒载体的浓度比例在3∶1,因为高浓度的DNA有利于片断与载体的连接,低浓度的DNA则会增加载体自连。 2.DNA连接酶对温度敏感,在15℃以上会迅速失活,因此,连接反应的温度控制必须严格。 3.为了保证RNA探针的质量,模板DNA片断的完整
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