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-80℃
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90天
- 英文名:
pOTB7-ATP5F1D
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pOTB7-ATP5F1D
货号:KM100390
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:基因模板
片段类型:cDNA
片段物种:人
原核抗性:Chl
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验和EcoRI消化去除OriP片段,T 连接酶连接,构建得到重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBNA1MAR。 质粒纯化和鉴定 所得质粒按质粒纯化试剂盒要求进行抽提纯化。测定光密度值(D260nm ),鉴定质粒的量和纯度,酶切,电泳鉴定。 细胞转染 细胞株COS-7在含10% 小牛血清的DMEM培养液、5%CO 、37℃ 恒温箱中培养。用阳离子脂质体Lipofectamine 2000介导质粒pcDNA3-EGFP.EBVR和pcDNA3.EGFP.EBNA1.MAR转染
第一节 概 述质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆 较小的DNA 片段(<10kb)且结构简单,质粒要比其它任何载体都要好。在质粒载体上进行克隆 ,从原理上说是很简单的,先用限制性内切酶切割质粒DNA 和目的DNA 片段, 然后体外使两者相连接, 再用所得到重组质粒转化细菌,即可完成。但在实际工作中, 如何区分插入有外源DNA 的重组质粒和无插入而自身环化的载体分子是较为困难的。通过调整连接反应中外源DNA 片段和载体DNA 的浓度比例,可以将载体的自身环化限制在一定程度之下
第一节 概 述 质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA片段(<10kb)且结构简单,质粒要比其它任何载体都要好。在质粒载体上进行克隆,从原理上说是很简单的,先用限制性内切酶切割质粒DNA和目的DNA片段, 然后体外使两者相连接, 再用所得到重组质粒转化细菌,即可完成。但在实际工作中, 如何区分插入有外源DNA的重组质粒和无插入而自身环化的载体分子是较为困难的。通过调整连接反应中外源DNA片段和载体DNA的浓度比例,可以将载体的自身环化限制在一定程度之下
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