- ￥680 - 1280
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM108183
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃
- 保质期：
90天
- 英文名：
pBlueScriptR-M1AP
- 库存：
100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
0.5ug/0.5ug
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥1280.0 |
英文名称：pBlueScriptR-M1AP
货号：KM108183
图谱：微客服
宿主：大肠杆菌
用途：基因模板
片段类型：cDNA
片段物种：人
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光标记：
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文献和实验Northern杂交试验指导手册－为制备RNA探针模板的DNA片断亚克隆
质粒 ( 50μg/μl) 6μl 目的DNA ( 100μg/μl) 2μl 10X 连接缓冲液 2μl DNA 连接酶 6μl 无菌蒸馏水 2． 反应管置于15℃条件下保温反应24小时，65℃加热10min.终止反应。 3．取5～10μl连接反应物用微型凝胶电泳检测连接效果，其余反应物于-20℃保存备用。 注意事项 1．保证连接反应中目的DNA与质粒载体的浓度比例在3∶1，因为高浓度的DNA有利于片断与载体的连接，低浓度的DNA则会增加
15℃条件下保温反应24小时，65℃加热10min.终止反应。 3.取5～10μl连接反应物用微型凝胶电泳检测连接效果，其余反应物于-20℃保存备用。 注意事项 1.保证连接反应中目的DNA与质粒载体的浓度比例在3∶1，因为高浓度的DNA有利于片断与载体的连接，低浓度的DNA则会增加载体自连。 2.DNA连接酶对温度敏感，在15℃以上会迅速失活，因此，连接反应的温度控制必须严格。 3.为了保证RNA探针的质量，模板DNA片断的完整
（抗DIG-AP），再加入碱性磷酸酶的作用底物（NBT/BCIP），若待检标本中有与探针同源的DNA序列，则探针与其杂交并与抗DIG-AP结合，碱性磷酸酶催化底物呈色，则在杂交膜上出现兰色斑点或条带。该探针可用于斑点杂交，菌落原位杂交及Southern blot杂交。 （一）DIG-DNA探针的制备（随机引物法标记） 【材料】 1．待标记DNA (0.5~3ug) 2．六核苷酸混合物 ( hexanucleotide mix) 3．dNTP标记混合
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