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-80℃
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90天
- 英文名:
pBlueScriptR-FZD6(3同义突变1点突变1点缺失)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pBlueScriptR-FZD6(3同义突变1点突变1点缺失)
货号:KM106273
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:基因模板
片段类型:cDNA
片段物种:人
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验,只有在位点序列旁出现GA或TC,该XbaI位才会被甲基化。 而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法: (1)选用上述酶的同功酶,如Sau3AI,DNA识别切割位点与MboI相同;但不受甲基化影响; (2)利用甲基化酶缺失的受体细胞进行DNA的制备,如E.coli JM110和链霉菌等,前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出,而后者细胞内本就没有甲基化酶,从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。
【交流】转载:JM109,DH5a,BL21这些感受态有何区别
数酶切位点的甲基化不影响切割,而有些会影响,如XbaI, BclI等。而且甲基化只发生在特定序列,以XbaI为例,只有在位点序列旁出现GA或TC,该XbaI位才会被甲基化。 而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法: (1)选用上述酶的同功酶,如Sau3AI,DNA识别切割位点与MboI相同;但不受甲基化影响; (2)利用甲基化酶缺失的受体细胞进行DNA的制备,如E.coli JM110和链霉菌等,前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出,而后者细胞内本就没有甲基化酶,从这些细胞中抽提的 DNA
区外的全部腺病毒基因组,其E1区缺失部位有两个非常罕见的由内含子编码的核酸内切酶位点(如,PI-Sce I和I-Ceu I)。穿梭载体较小、易于操作,用于将目的基因表达盒亚克隆到腺病毒骨架质粒载体中,在穿梭载体多克隆位点的两侧也含有上述特殊的酶切位点。首先将目的基因表达盒插入到穿梭载体中,用上述两种酶消化之.得到含有目的基因表达盒的穿梭载体片段与腺病毒骨架质粒(用两种酶预消化后)连接,转化E.coli DH5α即可得到腺病毒重组子克隆,将其用PacI消化暴露其反向末端重复序列后转染低代293细胞
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